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ELISA實驗檢測方法類型

閱讀：1445發(fā)布時間：2014-3-3

ELISA實驗基本原理是：

1.使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。

2.使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。

 

ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體?？稍O(shè)計出各種不同類型的檢測方法。 　

 

1.雙抗體夾心法，雙抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法。

 

2.捕獲法測IgM抗體，血清中針對某些抗原的特異性IgM常和特異性IgG同時存在，后者會干擾IgM抗體的測定。因此測定IgM抗本多用捕獲法，先將所有血清IgM(包括異性IgM和非特異性IgM)固定在固相上，在去除IgG后再測定特異性IgM。

 

3.雙位點一步法，在雙抗體夾心法測定抗原時，如應(yīng)用針對抗原分子上兩個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標(biāo)抗體，則在測定時可使標(biāo)本的加入和酶標(biāo)抗體的加入兩步并作一步(圖15-5)。這種雙位點一步不但簡化了操作，縮短了反應(yīng)時間，如應(yīng)用高親和力的單克隆抗體，測定的敏感性和特異性也顯著提高。單克隆抗體的應(yīng)用使測定抗原的ELISA提高到新水平。

 

4.競爭法，競爭法可用于測定抗原，也可用于測定抗體。以測定抗原為例，受檢抗原和酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合，因此結(jié)合于固相的酶標(biāo)抗原量與受檢抗原的量呈反比。

 

5.間接法測抗體，間接法是檢測抗體zui常用的方法，其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗體，故稱為間接法。

 

 

 


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