elisa試劑盒 質(zhì)粒抽提方法即去除 RNA，將質(zhì)粒與細(xì)菌基因組 DNA分開，去除蛋白質(zhì)及其它雜質(zhì)，以得到相對純凈的質(zhì)粒。
質(zhì)粒抽提zui常用的方法是堿裂解法，它具有得率高，適用面廣，快速，純度高等特點。關(guān)于堿裂解法的原理，復(fù)旦大學(xué)生化與分子生物學(xué)實驗室的有一篇專論，大家可以去看一下。這是一篇美文，elisa試劑盒非常有趣。文中提到了一個與幾乎所有能查到的資料不同的觀點，也是非常有啟發(fā)的。
下面介紹質(zhì)粒抽提的7大竅門：
1：搖菌時間 - 過夜培養(yǎng)是一個普遍接受的概念，而且適合大部分情況。如果出現(xiàn)了問題，調(diào)整培養(yǎng)時間會有幫助：Nick 多，則增加培養(yǎng)時間；酶切出現(xiàn)問題，則減少培養(yǎng)時間。
2：起始菌體量 - 大家習(xí)慣說“從多少 ml 菌液中抽提質(zhì)粒"，但一定要養(yǎng)成每次都觀察菌體量的習(xí)慣，因為質(zhì)粒畢竟是在菌體中，而且，抽提質(zhì)粒所用的試劑量，都只與菌體量有關(guān)。
elisa試劑盒3：菌體的*懸浮 - 如果沒有*懸浮菌體，則殘留的菌體團塊在溶液 II 加入后，變成一個外圍幾乎*裂解，往里不*裂解，中間沒有裂解的團塊。這個團塊在溶液 III 加入后，會有一部分蛋白質(zhì)繼續(xù)存在于溶液中，成為蛋白質(zhì)殘留的zui大根源。
4：使用相對過量的試劑 - 這是適合所有核酸抽提的建議。試劑相對過量的好處是：穩(wěn)定性好，純度高，操作更簡單。如果認(rèn)為這樣不經(jīng)濟，就少用一點菌體。
5：裂解時間 - 加入溶液 II 后，混勻，體系能立即變得清澈。體系如果變得清澈了，馬上加入溶液 III 中和。如果體系不馬上變清澈，下次少用一點菌液，或者多用一點溶液。如今的質(zhì)粒設(shè)計得越來越復(fù)雜了，奇怪的現(xiàn)象也越來越多，而所有的奇怪現(xiàn)象，多與裂解時間有關(guān)。
6：中和的操作 - 在 1.5ml 離心管中加入溶液 III 后，先顛倒兩次，使管底朝上，用指頭彈擊管底數(shù)次，再顛倒混勻。效果非常好。
7：中和后的離心去蛋白 - 一定要將蛋白質(zhì)*離心下去。如果發(fā)現(xiàn)離心后仍然有蛋白質(zhì)漂浮在液面，繼續(xù)離心的效果并不好；而將上清倒入另外一個離心管中，再離心，效果要好許多
Phospho-HSL (Ser660) 英文名稱： 磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體 0.1ml
HURP 英文名稱： 肝癌上調(diào)蛋白抗體 0.2ml
Hrasls3 英文名稱： HRAS樣抑制因子3抗體 0.2ml
CBS 英文名稱： *羧甲半*合成酶抗體 0.1ml
HEC1 英文名稱： 癌細(xì)胞高表達(dá)蛋白Hec1抗體 0.1ml
Phospho-HSL (Ser865) 英文名稱： 磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體 0.1ml
HDAC1 英文名稱： 組蛋白去乙?；?抗體 0.2ml
C1GALT1C1 英文名稱： 半乳糖基轉(zhuǎn)移酶2抗體 0.1ml
phospho-HP1 alpha (Tyr24) 英文名稱： 磷酸化異染色質(zhì)蛋白1抗體（果蠅） 1ml
Phospho-HP1(Tyr43) 英文名稱： 異染色質(zhì)蛋白1磷酸化抗體（果蠅） 1ml
HIF 2 alpha 英文名稱： 缺氧誘導(dǎo)因子2α /HIF-2α抗體 0.1ml
H1N1 matrix protein 2 英文名稱： 甲型流感病毒M2抗體 0.2ml
