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華騰專家教您如何選擇液相色譜固定相
點擊次數(shù)：1133 發(fā)布時間：2015-10-22
反相液相色譜可供選擇的固定相品種繁多令人頭昏眼花，即便是某一種固定相(例如C18)的可選擇品種也是很多的。
誠實說，我們的很多辦法開發(fā)都是在嘗試和錯誤中停止，這些都是基于我們喜歡的供給商提供的成熟的或者新興的固定相。即便是*的含有認(rèn)真考量的正交化及電腦優(yōu)先洗脫設(shè)計的“挑選”平臺，有時也不得不采取“色譜的本能”。
反相色譜中的保存是基于被剖析物、活動相、鍵合相以及鍵合了配體的硅膠外表的活性和其可接觸性之間的均衡。想要搞分明影響別離效果的保存機理，就要思索并明白化學(xué)鍵合相、活性硅膠外表的處置、硅膠外表的可接觸性等要素，這些都將影響色譜柱的原始選擇性及辦法開發(fā)的優(yōu)化。
在大多數(shù)反相別離中色散作用是起主要作用的，特別是那些運用未改性的烷基配體(C18、C8、C4)，其保存才能是與被剖析物的疏水性成正比的。含有芳香基團或不飽和基團的固定相或被剖析物停止剖析時，電荷轉(zhuǎn)移(或π-π)作用是起主要作用的。偶極-氫鍵互相作用關(guān)于極性化合物的保存是很重要的，含有“氰基”的固定相會加強對極性化合物的保存。被剖析物的電離局部與硅膠外表之間存在靜電作用力，這是由于硅膠外表有殘留的可離子化的硅醇基。
當(dāng)前有許多色譜柱分類系統(tǒng)存在，這些系統(tǒng)都是基于對已知化學(xué)探針物質(zhì)的檢測，從而來描繪固定相的共同特性。一個十分有用的例子就是美國藥典(USP)中的產(chǎn)質(zhì)量量研討數(shù)據(jù)庫(也就是PQRI系統(tǒng))。該數(shù)據(jù)庫采用保存(1,2)的疏水減法模型來描繪固定相的疏水性(H)，判別疏水性相似而有不同外形或流膂力學(xué)體積的被剖析物的空間構(gòu)造選擇性參數(shù)(S),在pH值為7.0和2.8時的氫鍵(作為路易斯酸或路易斯堿)和靜電作用參數(shù)(C)。pH值為7.0時硅醇基活性很強，pH為2.8時具有酸性的硅醇基將會與極性或可離子化的被剖析物發(fā)作作用產(chǎn)生拖尾。共同的或正交的固定相普通會有較大的S、B和C(7.0)值。這些大型的數(shù)據(jù)庫關(guān)于比擬固定相的特性是很有用的，“雷達圖”也是另一種比擬固定相特性的有用方式。
誠實說，我們的很多辦法開發(fā)都是在嘗試和錯誤中停止，這些都是基于我們喜歡的供給商提供的成熟的或者新興的固定相。即便是*的含有認(rèn)真考量的正交化及電腦優(yōu)先洗脫設(shè)計的“挑選”平臺，有時也不得不采取“色譜的本能”。
反相色譜中的保存是基于被剖析物、活動相、鍵合相以及鍵合了配體的硅膠外表的活性和其可接觸性之間的均衡。想要搞分明影響別離效果的保存機理，就要思索并明白化學(xué)鍵合相、活性硅膠外表的處置、硅膠外表的可接觸性等要素，這些都將影響色譜柱的原始選擇性及辦法開發(fā)的優(yōu)化。
在大多數(shù)反相別離中色散作用是起主要作用的，特別是那些運用未改性的烷基配體(C18、C8、C4)，其保存才能是與被剖析物的疏水性成正比的。含有芳香基團或不飽和基團的固定相或被剖析物停止剖析時，電荷轉(zhuǎn)移(或π-π)作用是起主要作用的。偶極-氫鍵互相作用關(guān)于極性化合物的保存是很重要的，含有“氰基”的固定相會加強對極性化合物的保存。被剖析物的電離局部與硅膠外表之間存在靜電作用力，這是由于硅膠外表有殘留的可離子化的硅醇基。
當(dāng)前有許多色譜柱分類系統(tǒng)存在，這些系統(tǒng)都是基于對已知化學(xué)探針物質(zhì)的檢測，從而來描繪固定相的共同特性。一個十分有用的例子就是美國藥典(USP)中的產(chǎn)質(zhì)量量研討數(shù)據(jù)庫(也就是PQRI系統(tǒng))。該數(shù)據(jù)庫采用保存(1,2)的疏水減法模型來描繪固定相的疏水性(H)，判別疏水性相似而有不同外形或流膂力學(xué)體積的被剖析物的空間構(gòu)造選擇性參數(shù)(S),在pH值為7.0和2.8時的氫鍵(作為路易斯酸或路易斯堿)和靜電作用參數(shù)(C)。pH值為7.0時硅醇基活性很強，pH為2.8時具有酸性的硅醇基將會與極性或可離子化的被剖析物發(fā)作作用產(chǎn)生拖尾。共同的或正交的固定相普通會有較大的S、B和C(7.0)值。這些大型的數(shù)據(jù)庫關(guān)于比擬固定相的特性是很有用的，“雷達圖”也是另一種比擬固定相特性的有用方式。