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上海豐壽實(shí)業(yè)有限公司
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閱讀:405發(fā)布時(shí)間:2015-1-4
近來(lái)越來(lái)越多的證據(jù)顯示,許多遺傳學(xué)差異并非直接影響基因,而是改變控制基因開(kāi)/關(guān)的調(diào)控序列。ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)在基因組中定位調(diào)控序列的新技術(shù),闡述了進(jìn)行數(shù)據(jù)分析時(shí)面臨的主要問(wèn)題。
活化的調(diào)控序列上結(jié)合有轉(zhuǎn)錄因子,轉(zhuǎn)錄因子是識(shí)別特定DNA序列的蛋白。一旦轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合,就會(huì)招募其他蛋白,使附近的基因開(kāi)始轉(zhuǎn)錄。在細(xì)胞中鑒定所有活躍的調(diào)控序列,對(duì)于理解基因組的作用機(jī)制非常重要。
常用的染色質(zhì)免疫沉淀法,直接檢測(cè)與轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合的DNA序列。這種方法一次只能提供一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子的信息,而細(xì)胞中可能有數(shù)百個(gè)轉(zhuǎn)錄因子處于活躍狀態(tài)。ELISA試劑盒的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面。
用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
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