此間接結合在固相上的抗原遠離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，ELISA試劑盒因此含雜質較多的抗原也可采用捕獲包被法,試驗的特異性、敏感性均由此得以改善，重復性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。
不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測抗DNA抗體時，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結合?？蓪⒕郾揭蚁┌逑冉涀贤饩€照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質，如聚賴氨酸、*等作預包被，也可提高核酸的結合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴大應用于各種抗原物質的定量測定。
脂類物質無法與固相載體結合，可將其在有機溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA試劑盒板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質自然干固在固相表面?？剐牧字贵w的ELISA試劑盒一般采用這種包被方式?？康氖堑鞍踪|分子結構上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質的分子量、等電點、濃度等的影響。載體對不同蛋白質的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質較小分子蛋白質通常含有更多的疏水基團，因此更易吸附到固相載體表面。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強的吸附力，其聯(lián)結多發(fā)生在Fc段上，抗體結合點暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。
