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公司動態(tài)

ELISA試劑盒反應(yīng)的具體條件

閱讀：344發(fā)布時間：2014-12-3

    ELISA試劑盒的原理ELISA試劑盒的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。這種雙位點夾心法具有很高的特異性，而且可以將受檢標本和酶標抗體一起保溫反應(yīng)，作一步檢測。 
    在一步法測定中，當標本中受檢抗原的含量很高時，過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結(jié)合，而不再形成 "夾心復(fù)合物"。類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后帶現(xiàn)象，此時反應(yīng)后顯色的吸光值（位于抗原過剩帶上）與標準曲線（位于抗體過剩帶上）某一抗原濃度的吸光值相同，如按常法測讀，所得結(jié)果將低于實際的含量，這種現(xiàn)象被稱為鉤狀效應(yīng)（hook effect），

    因為標準曲線到達高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應(yīng)嚴重時，反應(yīng)甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。因此在使用一步法試劑測定標本中含量可異常增高的物質(zhì)（例如血清中HBsAg 、AFP 和尿液hCG 等）時，ELISA試劑盒應(yīng)注意可測范圍的zui高值。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應(yīng)。 
    假使在被測分子的不同位點上含有多個相同的決定簇，例如 HBsAg 的a 決定簇，也可用針對此決定的同一單抗分別包被固相和制備酶結(jié)合物。ELISA試劑盒但在HBsAg的檢測中應(yīng)注意亞型問題，HBs Ag 有adr、adw、ayr 、ayw4 個亞型，雖然每種亞型均有相同的a 決定簇的反應(yīng)性，這也是用單抗作夾心法應(yīng)注意的問題。 


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