目前ELISA試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗,酶聯(lián)免疫試劑盒)方法已被廣泛應(yīng)用于多種細菌和病毒等疾病的診斷。在動物檢疫方面，ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗,酶聯(lián)免疫試劑盒)在豬傳染性胃腸炎、牛副結(jié)核病、牛傳染性鼻氣管炎、豬偽狂犬病、藍舌病等的診斷中已為廣泛采用的標(biāo)準(zhǔn)方法。
酶聯(lián)檢測免疫試劑盒對抗體的酶標(biāo)記方法及標(biāo)記效果測定
標(biāo)記方法；良好的酶結(jié)合物取決于兩個條件：即價的抗體和高活性的酶?？贵w的活性和純度對制備標(biāo)記抗體至關(guān)重要，因為特異性免疫反應(yīng)隨抗體活性和純度的增加而增強。在酶標(biāo)記過程中，抗體的活性有所降低，故需要純度高、效價高及抗原親和力強的抗體球蛋白，使用親和層析提純的抗體，可提高敏感性，而且可稀釋使用，減少非特異性吸附。
酶標(biāo)抗體標(biāo)記效果測定：測定內(nèi)容包括酶和抗體活性、結(jié)合物中酶含量和IgG含量、酶與IgG摩爾比值以及結(jié)合率。
酶與抗體的活性；常用瓊脂擴散或免疫電泳法，使抗原與抗體形成沉淀線，經(jīng)PBS漂洗1天，再以蒸餾水浸泡1小時，將瓊脂凝膠片浸于酶底物溶液中著色，如果出現(xiàn)應(yīng)有的顏色反應(yīng)，再用生理鹽水浸泡，顏色仍然不褪，表示結(jié)合物既有酶的活性，也有抗體活性。良好的結(jié)合物在顯色后，瓊擴滴度應(yīng)在1:16以上。另一個測定方法是用系列稀釋的酶標(biāo)抗體直接以ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗,酶聯(lián)免疫試劑盒)方法進行方陣滴定，此法不僅可以測定標(biāo)記效果，還可以確定酶標(biāo)抗體的使用濃度。
結(jié)合物的定量測定；ELISA試劑盒一般是對結(jié)合物中的酶和IgG進行定量測定。常用紫外分光光度計于403nm和280nm進行測定，
