ELISA試劑盒診斷試劑經(jīng)歷了從合成肽向基因工程抗原的過渡。由于歷史的原因，人們往往以反應本底的好壞來衡量ELISA試劑盒反應試劑盒。因此，有些廠家為了保持較好的本底而采用了單片段基因工程抗原及合成肽包被，穩(wěn)定性也成問題。也有廠家堅持ELISA試劑盒高的流行病學敏感度，科學地對待反應結果?；蚬こ炭乖^合成肽抗原有無抗原決定簇的肽片段；第二代產(chǎn)品包被的抗原既有基因工作抗原又有合成肽，只是當時的基因工程抗原不全，僅包括了HCV的核心區(qū)片段；第三代產(chǎn)品基本上采用了基因工程抗原，而且這些抗原包括更多、更穩(wěn)定、純度更高的HCV特異性抗菌素原。第三代試劑的敏感度大大提高了?；蚬こ炭乖c合成肽抗原的區(qū)別如下：
基因工程抗原是抗菌素原基因在質粒載體中原核或真核表達的蛋白質抗原，多以大腸桿菌或酵母為表達系統(tǒng)。該類抗原與合成肽相比具有以下特點。①分子量大。合成肽采用化學方法制備，由于工藝的局限，合成數(shù)量有限，只能達到數(shù)百個氨基酸；而利用基因工程制備的抗菌素原，分子量更大。②穩(wěn)定性好。包被抗原的穩(wěn)定性決定試劑盒的有效期，早期以合成肽為包裝抗原的試劑盒有效期只有3～4個月，改作基因工程抗原后有效期大大延長了。③基因工程抗原將特異性抗原決定簇基因融合表達，表達產(chǎn)物包含更多的抗原決定簇，可提高試劑盒的靈敏度，提高檢出率。④純化難度大?；蚬こ炭乖募兓夹g難度較大。合成多肽抗原是根據(jù)蛋白質抗原分子的某一抗原決定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。合成肽抗原有以下特點：分子量太??；一般只含有一個抗原決定簇；純度高；穩(wěn)定性差。
國內酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒廠家較多；不同廠家出產(chǎn)的試劑靈敏度與特異性存在一定的差別，資料顯示，不同廠家試劑的特異性和敏感性分別為89.4%，99.3%，78%，89%，存在較大差異。有的廠家酶標板孔間A值差大于15%；標記酶的活性及顯色液的穩(wěn)定比較差。使用劣質的ELISA試劑盒必然導致結果的假陽性或假陰性。因此，選擇高質量的試劑是保證結果準確的關鍵之一。
選擇ELISA試劑盒時應選擇靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性好、批間差異小、操作方便、省時的優(yōu)良檢測試劑，國家參比實驗室每年對各廠家的試劑進行質量評估并定期評估結果，可作為選擇試劑的主要依據(jù)； 要注意ELISA試劑盒的批號和出廠日期，雖然ELISA試劑盒的有效期多為1年。選擇剛出廠的試劑使用；不同廠家的ELISA試劑盒不能混用。
不同方法學的檢測ELISA試劑盒會使乙肝兩對半結果出現(xiàn)一些不同。例如：在實際工作中，常用ELISA檢測HBsAg結果為陰性，而電化學發(fā)光檢測為陽性。除方法學的靈敏度外，還存在使用單抗或多克隆抗體試劑的區(qū)別。。
