1．粉碎
通常用磨粉機、糧谷粉碎機、絞肉機等將塊狀的或顆粒較大的動植物樣本細化的過程。目的是增大樣本表面積，有利于待測組分的提取。
2．提取
ELISA試劑盒提取是使待測組分與樣品分離的過程。
提取的方法較多，有靜置法、勻漿法、振蕩提取法、裝置提取法等。現(xiàn)將常用的提取方法簡要介紹如下：
(1) 組織搗碎法是食品檢測中zui常用的一種提取方法，將經(jīng)粉碎的樣品與等量或數(shù)倍于其體積的溶劑混合，通過高速旋轉(zhuǎn)的葉片(100r／min)將樣本中的待測組分與溶劑有充分的接觸機會，使待測組分被提取出來。該方法提取效率高。使用的主要設備有高速組織搗碎機、組織勻漿機、高速均質(zhì)器等。在農(nóng)藥殘留量分析中幾乎都采用組織搗碎法提取，每次提取的時間約為3～5min，次數(shù)1～2次。在本操作過程中，需要注意以下事項：試樣和溶劑的總體積不應該超過搗碎缽容積的2／3，以免內(nèi)容物濺出；搗碎機的旋轉(zhuǎn)速度，一般是先慢后快；整個操作要在通風良好的環(huán)境下進行。
(2) 索氏提取法也是食品檢測中zui常用的提取方法之一。此法通過裝置——索氏提取器提取待測組分，提取效率高，操作簡便，但提取時間長。采用索氏提取法時，應充分考慮待測組分的熱穩(wěn)定性。
(3) 振蕩法在食品檢測中也較為常用。即將裝有試樣和提取溶劑的具塞容器，放在振蕩機上，進行往返振蕩或旋轉(zhuǎn)振蕩，使容器內(nèi)的提取溶劑與試樣充分接觸，以深入到樣本組織內(nèi)部提取待測組分。一般情況下，振蕩10-30min，重復提取2～3次。據(jù)報道，振蕩法與組織搗碎法和索氏提取法的提取效率相當。日本的食品分析方法中幾乎都采用振蕩法。
(4) 超臨界流體萃取儀、強化溶劑萃取儀是近二十年來發(fā)展起來的提取技術。另外還有一些輔助手段，如超聲波輔助提取、微波輔助提取等。
3．ELISA試劑盒凈化
經(jīng)過提取的待測組分，提取物中通常含有與該組分結(jié)構(gòu)相似的雜質(zhì)，將待測組分與雜質(zhì)分離的過程，稱為凈化。
該步驟是樣本前處理的技術難點，也是關系到檢測結(jié)果的真實性及檢測方法可靠性的重要步驟。主要方法有固相萃取法、液-液分配法、化學處理法、掃集共蒸餾法、低溫冷凍凈化法、前置色譜柱凈化法等。
ELISA試劑盒固相萃取法是目前應用zui多的凈化方法之一，通過吸附柱、分配柱、凝膠滲透柱、薄層板等實現(xiàn)，其原理是樣本的待測組分在層析柱中吸附劑上被吸附與被解吸的反復過程。常用的吸附劑有佛羅里硅土、氧化鋁、活性炭、硅膠、氧化鎂和纖維素等。
液-液分配法也是一種十分常用的凈化方法，其原理是利用待測組分在一組互不相溶的溶劑對內(nèi)的分配系數(shù)不同，通過反復多次分配，使待測組分與雜質(zhì)分離，以達到凈化目的。常用的溶劑對有乙腈提取液的正已烷分配、乙腈提取液的三氯甲烷分配、丙酮提取液的石油醚分配、丙酮提取液的二氯甲烷分配等。
4．濃縮
ELISA試劑盒由于凈化過程所引入的溶劑，可能會降低待測組分的濃度或不適宜直接進樣，需要去除部分或全部溶劑及進行溶劑轉(zhuǎn)換，此過程為濃縮或富集。主要通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器蒸干或惰性氣體(如氮氣)吹干除去溶劑。
