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技術(shù)文章

昆蟲(chóng)ELISA試劑盒操作步驟

閱讀:456發(fā)布時(shí)間:2015-1-21

操作步驟(僅供參考):昆蟲(chóng)ELISA試劑盒

切片:厚度5um

1、 取石蠟切片常規(guī)二甲苯脫蠟。

2、 系列乙醇水化。

3、 Bouin溶液放在微波爐中,中度加熱30-60s后,取出放入切片處理10min。

4、 流水沖洗10min。

5、 切片試劑(A)處理5min,蒸餾水沖洗2~3次。

6、 切片置于試劑(B)中染色20min。

7、 流水沖洗2~5 min。

8、 用微波爐強(qiáng)火45s~60℃預(yù)熱試劑(C),將切片置于試劑(C)中min。

8、 流水沖洗2~5 min。

9、 配制試劑(D),將切片置于試劑(D)中,避光染色60min。

10、流水沖洗片刻,蒸餾水沖洗2~3次,每次3~5min。

11、配制試劑(E),將切片置于試劑(E)中1min。

12、蒸餾水沖洗2~3次,每次3~5min。

13、將切片置于試劑(F)中染色5min。

14、直接轉(zhuǎn)入試劑(G)中染色5min。

15、蒸餾水沖洗2~3次,每次3~5min。

16、脫水:95%乙醇1min,100%乙醇2次,每次1min。

17、將切片置于試劑(F)中染色5min。

18、100%乙醇2次,每次1min。

19、二甲苯透明,覆蓋玻璃片。



染色結(jié)果:

細(xì)胞核和彈力纖維

黑色

膠原蛋白和網(wǎng)狀纖維

黃色

蛋白聚糖

藍(lán)色

類(lèi)纖維素、纖維素

深紅色

肌肉

紅色

 


注意事項(xiàng):

1、 彈力纖維分化常在2~3分鐘內(nèi)完成。

2、 流水充分沖洗以除去試劑(C)液是非常重要的。若沖洗失敗會(huì)抑制后續(xù)的染色步驟。

3、 這種染色法可顯示新型隱球菌,將其染成藍(lán)色。

4、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并帶一次性手套操作。

儲(chǔ)存條件:4℃,避光,6個(gè)月有效。


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