人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞Ramos細(xì)胞 支原體污染的檢測
相差顯微鏡觀察 將細(xì)胞接種于事先放置于培養(yǎng)瓶內(nèi)的支持物(一般用長形蓋玻片),24 小時后用清潔塵鑷子從培養(yǎng)瓶中取出支持物,細(xì)胞面向上放置于載物片上,再蓋上較大蓋玻片,用相差油鏡觀察;若不用支持物培養(yǎng)法,直接取少許培養(yǎng)液滴在載物片上,再蓋上蓋片觀察亦可。支原體在鏡下呈暗色微小顆粒,多位于細(xì)胞與細(xì)胞之間,有時可見類似于布朗運(yùn)動的表現(xiàn)。應(yīng)注意與細(xì)胞破碎溢出的內(nèi)容物如線粒體等相區(qū)別。
人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞U937 U-937細(xì)胞
人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞U251細(xì)胞
人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞THP-1細(xì)胞
人結(jié)直腸癌細(xì)胞T84細(xì)胞
人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞SW-13細(xì)胞
小鼠骨髓瘤細(xì)胞Sp2/0-Ag14細(xì)胞
兔主動脈平滑肌細(xì)胞SMC細(xì)胞
人皮膚黑色素瘤細(xì)胞SK-MEL-1細(xì)胞
人腦瘤細(xì)胞SF767細(xì)胞
人腦瘤細(xì)胞SF763細(xì)胞
人腦瘤細(xì)胞SF126細(xì)胞
人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞RAMOS(RA.1)細(xì)胞
人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞Ramos細(xì)胞
人胃腺癌細(xì)胞BGC-823 BGC823細(xì)胞
小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞BV2細(xì)胞
非洲綠猴腎細(xì)胞CV-1 CV1細(xì)胞
人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞Ramos細(xì)胞 支原體污染的檢測 低漲處理地衣紅染色觀察 取已在培養(yǎng)瓶中的支持物蓋片或培養(yǎng)液,用新鮮配制的 0.5%枸椽酸溶液處理蓋片細(xì)胞。用新配制的 Carnoy 液固定兩次,每次 10 分鐘,取出蓋片涼干。用培養(yǎng)液時,先吸取 1mL,500~800r/min 離心 5 分鐘后去除上清,留 0.2mL,將 0.5%枸椽酸溶液加入其中,置 10 分鐘,加入 Carnoy 液固定,離心棄上清固定液,余 0.2mL 沉淀物,制成 2~3張涂片。然后用 2%醋酸依地紅(地衣紅 2g,冰醋酸 60mL,加蒸餾水至 100mL)染 5 分鐘。純酒精過三次,每次 1 分鐘,封入 Euparal 或樹膠中。若染色過深,可先用 75%酒精脫色,再封片。鏡下觀察見支原體呈暗紫色小點(diǎn),位于細(xì)胞外或細(xì)胞之間。
人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-435S細(xì)胞
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞NIH/3T3細(xì)胞
人惡性多發(fā)性畸胎瘤細(xì)胞NTERA-2細(xì)胞
小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞P19細(xì)胞
人卵巢畸胎瘤細(xì)胞PA-1細(xì)胞
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞PA12細(xì)胞
人胰腺癌細(xì)胞PANC-1細(xì)胞
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞PC-12 PC12細(xì)胞
人成骨肉瘤細(xì)胞Saos-2細(xì)胞
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SH-SY5Y細(xì)胞
人卵巢腺癌細(xì)胞SK-OV-3 SKOV3細(xì)胞
人骨肉瘤細(xì)胞U-2 OS U2OS;U2-OS;U-2OS細(xì)胞
小鼠血細(xì)胞WEHI-3細(xì)胞 WEHI3
小鼠成纖維細(xì)胞Φ2細(xì)胞
人橫紋肌肉瘤細(xì)胞A-204細(xì)胞
人肺腺癌細(xì)胞Calu-3細(xì)胞
非洲綠猴腎細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化)COS-7 COS7細(xì)胞
人腎癌Wilms細(xì)胞G401細(xì)胞
人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞Ramos細(xì)胞 支原體污染的檢測 支原體污染的檢測 熒光染色法觀察 用熒光染料 Hoechst33258,此染料能與 DNA 特異地結(jié)合,可使支原體內(nèi)的 DNA 著色,然后用熒光顯微鏡觀察。染色方法為:用支持物蓋片培養(yǎng)法將細(xì)胞接種在蓋片上,在細(xì)胞匯合前(即未長滿前)取出玻片,于碟皿中,用不含酚紅的 Hanks 液漂洗,1:3醋酸鉀固定 10 分鐘,再用生理鹽水漂洗后置于 50μg/mL 的 Hoechst33258(生理鹽水配制)中染色 10 分鐘,置于蒸餾水漂洗 1~2 分鐘,向細(xì)胞面滴加數(shù)滴 pH5.5 磷酸緩沖液,然后置熒光顯微鏡下觀察。若用細(xì)胞培養(yǎng)液,先離心去除上清液,再加入 Hanks 液漂洗,離心棄上清后加入1:3 醋酸甲醇固定 10 分鐘,再用生理鹽水漂洗后去上清液,再用 Hoechst33258 染色 10 分鐘,加入蒸餾水漂洗,離心去上清蒸餾水,加 3~5 滴 pH5.5 磷酸緩沖液,稍吹打使沉淀細(xì)胞重懸浮,用吸管吸出,滴于載物片上,蓋上蓋片后觀察。熒光顯微鏡下支原體呈綠色小點(diǎn),散在于細(xì)胞周圍或附于細(xì)胞表面。
人肝癌細(xì)胞Hep G2 HepG2細(xì)胞
人包皮成纖維細(xì)胞HFF細(xì)胞
人早幼粒急性白血病細(xì)胞HL-60細(xì)胞
人骨肉瘤細(xì)胞HOS細(xì)胞
人慢性髓系白血病細(xì)胞K562細(xì)胞
人前列腺癌細(xì)胞LNCaP細(xì)胞
人乳腺癌細(xì)胞MCF 7B細(xì)胞
小鼠紅白血病細(xì)胞MEL細(xì)胞
人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞MOLT-4細(xì)胞
人胚肺成纖維細(xì)胞MRC-5細(xì)胞
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H209細(xì)胞
人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞Raji細(xì)胞
小鼠垂體瘤細(xì)胞AtT-20 AtT20細(xì)胞
非洲綠猴腎細(xì)胞VERO細(xì)胞