肝細胞培養(yǎng) NCTC1469細胞小鼠正常肝細胞
初代組織塊培養(yǎng):
取新鮮肝臟,先剝除被膜和血管等纖維成分,用刀或剪刀把肝臟剪成1mm3左右的小塊,采用帖壁培養(yǎng)法。
初代消化法培養(yǎng):
把肝組織切成2~4立方毫米的小塊,用不含鈣鎂的BSS液洗兩次。移入1:1的0.1%胰蛋白酶和0.1%膠原酶(都用無鈣鎂BSS配置)中,4℃冷消化10~12小時后,通過250微米和64微米尼龍網或不銹鋼紗網濾過。
收集細胞、BSS液洗1~2次、計數(shù)、接種培養(yǎng)。肝細胞培養(yǎng) NCTC1469細胞小鼠正常肝細胞 消化培養(yǎng)肝細胞的另一種方法是灌流法;肝臟灌流需用全肝,以較小動物如小鼠和大鼠為好。
無菌解剖動物,取出肝臟,先用BSS洗除血污。取5ml注射器一支,吸取消化液后,把注射器頭輕輕插入肝管中,用線繩結扎牢固,以防消化液漏出,輕輕把消化液注入肝管系統(tǒng),并不時輕揉壓肝臟,以便消化液進入肝小葉中;
消化液在肝內停留20~30分后,在吸出消化液的同時并輕揉壓肝臟,以使肝細胞脫落和消化液吸出。
待吸凈消化液后,注入離心管中,低速離心分離,用RPMI1640培養(yǎng)基培養(yǎng)(較其它培養(yǎng)基為好),能獲得較純的肝上皮細胞和獲較好的效果。
傳代培養(yǎng):
待細胞生長連接成片后,用BSS洗一二次,肝細胞培養(yǎng) NCTC1469細胞小鼠正常肝細胞 加1:1的0.025%胰蛋白酶和0.02%EDTA混合消化3~5分鐘,待細胞回縮,便停止消化,棄掉消化液,用BSS洗一二次,注入營養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液,再接種培養(yǎng)。
KP-N-NS 人腎上腺神經母細胞瘤細胞
LS 180 (CL-187) [LS180] 人結腸腺癌細胞
LTEP-s 人肺鱗癌細胞
LTEP-sm 人小細胞肺癌細胞
M5076 小鼠卵巢網織細胞肉瘤細胞
MDBK 牛腎細胞
NCI-H205 人腎上腺腺瘤細胞
NCTC 1469 [NCTC1469] 小鼠正常肝細胞
Neuro-2a [N2a; Neuro-2a] 小鼠神經母細胞瘤細胞
OS-RC-2 人腎癌細胞
RD 人惡性胚胎橫紋肌肉瘤細胞
SiHa 人子宮頸鱗狀細胞癌細胞
T24 人膀胱移行細胞癌細胞
Tca-8113 [Tca8113] 人舌鱗癌細胞
TM3 正常小鼠睪丸Leydig細胞
TM4 正常小鼠睪丸Sertoli細胞
ΦA 人胚腎細胞(293來源病毒包裝細胞)
ΦA-GP 人胚腎細胞(293來源病毒包裝細胞)
Ca759 小鼠乳腺癌瘤株
Ca761 小鼠乳腺癌瘤株
Ca763 小鼠乳腺癌瘤株
L7712 小鼠T細胞性白血病瘤株
L7912 小鼠T細胞性白血病瘤株
HP615 小鼠肺癌瘤株
ZM755 小鼠滑膜肉瘤瘤株
P615 小鼠乳頭狀肺腺癌瘤株
H22 小鼠肝癌瘤株
Fc 小鼠前胃癌瘤株
U14 小鼠子宮頸癌瘤株
U27 小鼠子宮頸癌瘤株
LⅡ 小鼠網織細胞肉瘤瘤株
G422 小鼠腦神經膠質母細胞瘤瘤株
L615 小鼠網織細胞性白血病瘤株
W256 Walker癌肉瘤256瘤株
Ehrlich 艾氏腹水瘤瘤株
LA795 小鼠肺腺癌瘤株
S-180 [S180] 小鼠肉瘤瘤株
VX2 兔間變表皮鱗癌瘤株
ME (Me) 小鼠黑色素瘤瘤株
DCS 小鼠樹突狀細胞肉瘤瘤株
B22 小鼠未分化神經膠質瘤瘤株
B16 小鼠黑色素瘤瘤株
LLT 小鼠Lewis肺癌瘤株
BNL.1ME A.7R.1 小鼠肝瘤株
A-375 [A375] 人惡性黑色素瘤瘤株
MCF7 [MCF-7] 人乳腺癌瘤株
Calu-3 人肺腺癌瘤株
LTEP-s 人肺鱗癌瘤株
HCT 116 [HCT116] 人結直腸腺癌瘤株
HeLa 人宮頸癌瘤株
769-P 人腎癌細胞
ACHN 人腎上腺癌細胞
BT-20 人乳腺癌細胞
BT-549 [BT549] 人乳腺導管癌細胞
Caki-2 人腎透明細胞癌細胞
CAL-27 人舌鱗癌細胞
Caov-3 人卵巢癌細胞
COLO 201 人結直腸腺癌細胞
D283 人腦髓母細胞瘤細胞
DU4475 人乳腺上皮細胞
EB-3 人伯基特淋巴瘤細胞
H1HeLa 人宮頸癌細胞
HS 683 人腦膠質瘤細胞
J82 人膀胱癌細胞
Jurkat 人急性T淋巴細胞白血病細胞
JurkatE6-1 人急性T淋巴細胞白血病細胞
MDA-MB-175Ⅶ 人乳腺導管癌細胞
MDA-MB-415 人乳腺癌細胞
MDA-MB-435 人乳腺導管癌細胞
MDA-MB-436 人乳腺癌細胞
NCI-H1703 人肺鱗癌細胞