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肝細胞培養(yǎng) NCTC1469細胞小鼠正常肝細胞

時間:2014/12/1閱讀:1085
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肝細胞培養(yǎng)  NCTC1469細胞小鼠正常肝細胞
初代組織塊培養(yǎng):
取新鮮肝臟,先剝除被膜和血管等纖維成分,用刀或剪刀把肝臟剪成1mm3左右的小塊,采用帖壁培養(yǎng)法。
初代消化法培養(yǎng):
把肝組織切成2~4立方毫米的小塊,用不含鈣鎂的BSS液洗兩次。移入1:1的0.1%胰蛋白酶和0.1%膠原酶(都用無鈣鎂BSS配置)中,4℃冷消化10~12小時后,通過250微米和64微米尼龍網或不銹鋼紗網濾過。
收集細胞、BSS液洗1~2次、計數(shù)、接種培養(yǎng)。肝細胞培養(yǎng)  NCTC1469細胞小鼠正常肝細胞 消化培養(yǎng)肝細胞的另一種方法是灌流法;肝臟灌流需用全肝,以較小動物如小鼠和大鼠為好。
無菌解剖動物,取出肝臟,先用BSS洗除血污。取5ml注射器一支,吸取消化液后,把注射器頭輕輕插入肝管中,用線繩結扎牢固,以防消化液漏出,輕輕把消化液注入肝管系統(tǒng),并不時輕揉壓肝臟,以便消化液進入肝小葉中;
消化液在肝內停留20~30分后,在吸出消化液的同時并輕揉壓肝臟,以使肝細胞脫落和消化液吸出。
待吸凈消化液后,注入離心管中,低速離心分離,用RPMI1640培養(yǎng)基培養(yǎng)(較其它培養(yǎng)基為好),能獲得較純的肝上皮細胞和獲較好的效果。
傳代培養(yǎng):
待細胞生長連接成片后,用BSS洗一二次,肝細胞培養(yǎng)  NCTC1469細胞小鼠正常肝細胞 加1:1的0.025%胰蛋白酶和0.02%EDTA混合消化3~5分鐘,待細胞回縮,便停止消化,棄掉消化液,用BSS洗一二次,注入營養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液,再接種培養(yǎng)。

KP-N-NS    人腎上腺神經母細胞瘤細胞

LS 180 (CL-187) [LS180]    人結腸腺癌細胞
LTEP-s    人肺鱗癌細胞
LTEP-sm    人小細胞肺癌細胞
M5076    小鼠卵巢網織細胞肉瘤細胞
MDBK    牛腎細胞
NCI-H205    人腎上腺腺瘤細胞
NCTC 1469 [NCTC1469]    小鼠正常肝細胞
Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]    小鼠神經母細胞瘤細胞
OS-RC-2    人腎癌細胞
RD    人惡性胚胎橫紋肌肉瘤細胞
SiHa    人子宮頸鱗狀細胞癌細胞
T24    人膀胱移行細胞癌細胞
Tca-8113 [Tca8113]    人舌鱗癌細胞
TM3    正常小鼠睪丸Leydig細胞
TM4    正常小鼠睪丸Sertoli細胞
ΦA    人胚腎細胞(293來源病毒包裝細胞)
ΦA-GP    人胚腎細胞(293來源病毒包裝細胞)
Ca759    小鼠乳腺癌瘤株
Ca761    小鼠乳腺癌瘤株
Ca763    小鼠乳腺癌瘤株
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L7912    小鼠T細胞性白血病瘤株
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P615    小鼠乳頭狀肺腺癌瘤株
H22    小鼠肝癌瘤株
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U14    小鼠子宮頸癌瘤株
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LⅡ    小鼠網織細胞肉瘤瘤株
G422    小鼠腦神經膠質母細胞瘤瘤株
L615    小鼠網織細胞性白血病瘤株
W256    Walker癌肉瘤256瘤株
Ehrlich    艾氏腹水瘤瘤株
LA795    小鼠肺腺癌瘤株
S-180 [S180]    小鼠肉瘤瘤株
VX2    兔間變表皮鱗癌瘤株
ME (Me)    小鼠黑色素瘤瘤株
DCS    小鼠樹突狀細胞肉瘤瘤株
B22    小鼠未分化神經膠質瘤瘤株
B16    小鼠黑色素瘤瘤株
LLT    小鼠Lewis肺癌瘤株
BNL.1ME A.7R.1    小鼠肝瘤株
A-375 [A375]    人惡性黑色素瘤瘤株
MCF7 [MCF-7]    人乳腺癌瘤株
Calu-3    人肺腺癌瘤株
LTEP-s    人肺鱗癌瘤株
HCT 116 [HCT116]    人結直腸腺癌瘤株
HeLa    人宮頸癌瘤株
769-P    人腎癌細胞
ACHN    人腎上腺癌細胞
BT-20    人乳腺癌細胞
BT-549 [BT549]    人乳腺導管癌細胞
Caki-2    人腎透明細胞癌細胞
CAL-27    人舌鱗癌細胞
Caov-3    人卵巢癌細胞
COLO 201    人結直腸腺癌細胞
D283    人腦髓母細胞瘤細胞
DU4475    人乳腺上皮細胞
EB-3    人伯基特淋巴瘤細胞
H1HeLa    人宮頸癌細胞
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JurkatE6-1    人急性T淋巴細胞白血病細胞
MDA-MB-175Ⅶ    人乳腺導管癌細胞
MDA-MB-415    人乳腺癌細胞
MDA-MB-435    人乳腺導管癌細胞
MDA-MB-436    人乳腺癌細胞
NCI-H1703    人肺鱗癌細胞

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