人淋巴瘤細(xì)胞Romas細(xì)胞株
一、 實驗原理
1．非顯帶染色體的識別
1968年以前，不通過帶紋，而從染色體整體分析。
1960年，丹佛會議上，提出了人類有絲分裂染色體命名標(biāo)準(zhǔn)體制草案，為以后的所有命名報告奠定了基礎(chǔ)。
1963年，倫敦會議上，正式批準(zhǔn)Patan 提出的A、B、C、D、E、F、G七個字母表示七組染色體的分類法。
1966年，芝加哥會議上，提出人類染色體組和畸變速記符號的標(biāo)準(zhǔn)命名體制。
A組（1-3號）
1號：zui大的中央著絲粒染色體，長臂靠近著絲粒外有次縊痕。
人紅系白血病細(xì)胞TF-1
人原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞UT-7
人 Burkkit淋巴瘤細(xì)胞Daudi
人T淋巴瘤細(xì)胞（Tet-on基因修飾）Jurkat D,E
人T淋巴瘤細(xì)胞 Jurkat亞系Jurkat77
人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞TALL-104
人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞HuT 78
人急性T淋巴細(xì)胞性白血病細(xì)胞I 2.1
人伯基特淋巴瘤細(xì)胞EB-3
人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞Jurkat
人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞JurkatE6-1
IL-2依賴的人淋巴 T細(xì)胞系Kit225
人T細(xì)胞白血病細(xì)胞C8166
人急性骨髓白血病細(xì)胞KG-1a
人T淋巴瘤細(xì)胞HUT 102
人淋巴瘤細(xì)胞Romas細(xì)胞株
人B淋巴細(xì)胞WIL2-S
人急性 T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞Jurkat
人淋巴瘤細(xì)胞Romas
人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞J-111
非何杰金氏淋巴瘤細(xì)胞Wien 133
人急性T細(xì)胞白血病細(xì)胞Jurkat CA
人外周血 B淋巴細(xì)胞IM-9
人T細(xì)胞白血病細(xì)胞6T-CEM
人類淋巴母細(xì)胞瘤細(xì)胞HLCL 21B8
人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞Dami
人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞HEL
人 Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞NAMALWA
人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞MEG-01
人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞A3
急性髓系細(xì)胞白血病細(xì)胞KG-1
人急性非 B非 T淋巴細(xì)胞性白血病細(xì)胞Reh
人急性淋巴細(xì)胞白血病 T淋巴細(xì)胞CCRF-CEM
人 Burkkit淋巴瘤細(xì)胞Daudi
人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞CEM/C1
人類淋巴母細(xì)胞瘤細(xì)胞HLCL 9B10
人類淋巴母細(xì)胞瘤細(xì)胞HLCL 4F10
人類淋巴母細(xì)胞瘤細(xì)胞HLCL 4B9
人類淋巴母細(xì)胞瘤細(xì)胞HLCL 7D7
人類淋巴母細(xì)胞瘤細(xì)胞HLCL 9C3
人淋巴瘤細(xì)胞Romas細(xì)胞株
2號：zui大的亞中著絲粒染色體。
3號：中央著絲粒染色體，比1號小三分之一。
B組（4-5號）：為較大的亞中央著絲粒染色體，二者不易區(qū)分。
C組（6-12號，X）：中等近中央著絲粒染色體，彼此難區(qū)分。
6、7、9、11號：著絲粒略近中央。
8、10、12號：偏離中央。
9號：q有次縊痕。
X位于6、7之間。
D組（13-15號）：中等近端著絲點染色體，p常有隨體。
E組（16-18號）
16號：中等中央著絲粒染色體，q上有次縊痕。
17號：較小，近中央著絲粒染色體。
18號：較小，近中央著絲粒染色體，p比17號更短。
F組（19-20號）：小的中央著絲粒染色體，彼此不易區(qū)分。
G組（21-22號，Y）：小的近端著絲粒染色體。
21、22號：p常有隨體，q常呈分枝狀彼此不易區(qū)分。
Y：p無隨體，q通常平行靠近。
2．顯帶染色體識別
1968年，T.Caspwesson 和他的同事們在瑞典發(fā)表了用鹽酸奎吖因或奎吖芥子染色的植物染色體的帶型圖。1970年，他們發(fā)表了zui早的人類分帶核型。
1971年，巴黎會議上通過的文件不僅對每一條染色體而且對染色體區(qū)和帶都提出了基本鑒定體制，開創(chuàng)了用帶的組成來描述結(jié)構(gòu)重排和變異的方法。
1977年，斯德哥爾摩會議上，
3．高分辨顯帶染色體識別
在細(xì)胞分裂時加入氨甲基喋呤使DNA合成暫時阻斷，細(xì)胞分裂在早期時進(jìn)入不同步化，終止培養(yǎng)前15分鐘加入秋水仙素，顯帶可達(dá)2000條。
二、實驗方法
利用Geimsa染色液倒染10-15分鐘→在盛水塑料杯中沖涮→風(fēng)干
三、鏡檢
觀察細(xì)胞的標(biāo)準(zhǔn)為：
1．細(xì)胞完整，輪廓清晰，染色體分布在同一水平面上。
2．染色體形態(tài)和分布良好。
3．無重疊，即使有個別重疊，也要能明確辯認(rèn)，以免差錯。
4．所觀察的細(xì)胞處于同一有絲分裂階段，即染色體螺旋化程度或染色體長短大致一樣。
5．在所觀察的細(xì)胞周圍，沒有離散的單個或多個染色體存在，以免影響計數(shù)。
四、顯微攝影
一、 核型分析
1．核型：一個細(xì)胞內(nèi)所有染色體按一定順序排列起來，代表著某一個體所有細(xì)胞的染色體組成，包括數(shù)目、形態(tài)、大小等，分為A、B、C、D、E、F、G等七組和一組性染色體。
2．組型：把核型按模式圖的形式表現(xiàn)出來，代表一個種的染色體組成。
3．染色體分組及標(biāo)準(zhǔn)
4．方法和步驟：
1)顯微鏡分析：觀察標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞20-50個。
2)顯微照片分析：
①染色體計數(shù)
②染色體測量
相對長度=單個染色體長度/ 整套單倍染色體總長×100
臂比率=q/p
1.0-1.7
1.7-3.0
3.0-7.0
7.0 以上
著絲點指數(shù)=p/(p+q) ×100
③配對：據(jù)大小、著絲點位置、隨體有無，zui后定細(xì)胞組染色體。
④染色體排列分組：p向上，q向下，著絲點排列在一條直線上。
⑤制作核型分析板——作出書面報告。
