種細(xì)胞的篩選是為細(xì)胞次生產(chǎn)物生產(chǎn)提供高產(chǎn)細(xì)胞系的中間環(huán)節(jié)，為了獲得一致的細(xì)胞產(chǎn)量和產(chǎn)物產(chǎn)量，根據(jù)不同的植物和產(chǎn)物類型，有不同的篩選方法。其基本操作是單細(xì)胞平板培養(yǎng)。
a. 將細(xì)胞懸浮系在上述培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件下，每隔7天繼代一次，每次按細(xì)胞懸液與新鮮培養(yǎng)基1:5的比例接種；
b. 將新鮮配制的瓊脂培養(yǎng)基在未凝固前，與處于對數(shù)生長期的細(xì)胞懸浮液按4:1混合后，平鋪在培養(yǎng)皿中，操作時特別注意溫度不能過高，以免給細(xì)胞造成傷害。如果懸浮系中的有過大的細(xì)胞團(tuán)，需過濾除去大的細(xì)胞團(tuán)。
c. 在細(xì)胞分裂形成可見的小愈傷組織時，將單個細(xì)胞的愈傷組織分別接種在平板培養(yǎng)基上單獨培養(yǎng)，由每個細(xì)胞形成的愈傷組織即為一個細(xì)胞系（clone）。
d. 待愈傷組織長至能檢測成分的大小時，取每個愈傷組織的一半用于成分分析，另一半繼續(xù)培養(yǎng)。成分分析完成后，淘汰不符合要求的愈傷組織，對復(fù)合要求的愈傷組織擴(kuò)大繁殖。
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About細(xì)胞冷凍保存溫度
冷凍保存溫度是指能長期保存細(xì)胞的超低溫度，在此溫度下，細(xì)胞生化反應(yīng)極其緩慢甚至停止，但經(jīng)過長期保存，在復(fù)蘇后仍能保持正常的結(jié)構(gòu)和功能。
不同的細(xì)胞和生物體以及使用不同的冷凍保存方法要取得同樣的冷凍保存效果，冷凍保存溫度可以不同。但從實際和效益的觀點出發(fā)，液氮溫度（-196℃/）是 目前*的冷凍保存溫度。在-196℃/時，細(xì)胞的生命活動幾乎*停止，但復(fù)蘇后細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能完好。如果冷凍過程得當(dāng)，一般生物樣品在-196℃/下均可保存十年以上。應(yīng)用-70℃/～-80℃/保存細(xì)胞，短期內(nèi)對細(xì)胞的活性無明顯影響，但隨著凍存時間延長，細(xì)胞存活率明顯降低。在冰點到-40℃/范圍內(nèi)保存細(xì)胞的效果不佳。
方法
非玻璃化凍存是利用各種溫級的冰箱分階段降溫至-70℃～-80℃，然后直接投入液氮進(jìn)行保存；或者是利用電子計算機(jī)程控降溫儀以及利用液氮的氣、液，按一定的降溫速率從室溫降至-100℃以下，再直接投入液氮保存的方法。以該種方法凍結(jié)的細(xì)胞懸液或多或少都有冰晶的形成。
1.待凍存細(xì)胞懸液的制備
（1）按常規(guī)方法消化處于對數(shù)生長期的細(xì)胞培養(yǎng)物，制備單細(xì)胞懸液，并計算細(xì)胞總數(shù)；
（2）將細(xì)胞懸液以800～1000r/min離心5min，去上清夜；
（3）向細(xì)胞沉淀物中加入冷凍保護(hù)液，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞密度達(dá)1×106～1×107個/ml；
（4）按每管1～1.5ml的量分裝于凍存管內(nèi)，擰緊管蓋；
（5）再凍存管上做好標(biāo)記，包括細(xì)胞代號及凍存日期。
2.分級冷凍
（1）先將凍存管放入普通冰箱冷藏室（4～8℃），約40min；
（2）接著將凍存管置于普通冰箱冷凍室（-10℃～-20℃），約30～60min；
（3）將凍存管轉(zhuǎn)入低溫冰箱（-30℃），放置30min左右；
（4）然后將凍存管轉(zhuǎn)移到超低溫冰箱（-70℃～-80℃），過夜；
（5）zui后將凍存管投入液氮保存。
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