大鼠垂體瘤細(xì)胞GH3細(xì)胞 無菌操作注意事項
體外培養(yǎng)細(xì)胞缺乏抗感染能力,所以防止污染是決定培養(yǎng)成功或失敗的首要條件。即便使用設(shè)備完善的實驗室。若實驗者粗心大意,技術(shù)操作不規(guī)范,也會導(dǎo)致污染。因而.為在一切操作中為zui大可能的保證無菌.每一項工作都必須做到有條不紊和*靠。
大鼠垂體瘤細(xì)胞GH3細(xì)胞 無菌操作注意事項【培養(yǎng)前準(zhǔn)備】
在開始實驗前要制定好實驗計劃和操作程序。有關(guān)數(shù)據(jù)的計算要事先做好。根據(jù)實驗要求,準(zhǔn)備各種所需器材和物品、清點無誤后將其放置操作場所(培養(yǎng)室、超凈臺)內(nèi),然后開始消毒。這可以避免開始實驗后.囚物品不全往返拿取而增加污染機會。
大鼠垂體瘤細(xì)胞GH3細(xì)胞 無菌操作注意事項【操作野消毒】
無菌培養(yǎng)室每天都要用0.2%的新潔爾滅拖洗地面—次(拖布要).紫外線照射消毒30-50min,超凈工作臺臺面每次實驗前要用75%酒精擦洗。然后紫外線淌毒30min。在工作臺面消毒時切勿將培養(yǎng)細(xì)胞和培養(yǎng)用液同時照射紫外線,消毒時工作臺面上用品不要過多或重疊放置.否則會遮擋射線降低消毒效果。—些操作用具如移液器、廢液缸、污物盒、試管架等用75%酒精擦洗后置于臺內(nèi)同時紫外線消毒。
【洗手和著裝】
原則上和外科手術(shù)相同。平時僅做觀察不做培養(yǎng)操作時,可穿裝細(xì)胞培養(yǎng)室內(nèi)紫外線照射30min的清潔工作服。在利用超凈臺工作時,因整個前臂要伸入箱內(nèi),應(yīng)著長袖的清潔工作服,并于開始操作前要用75%酒精消毒手。如果實驗過程中手觸及可能污染的物品和出入培養(yǎng)室都要重新用消毒液洗手。進入原代培養(yǎng)室需*洗手還要戴口罩、著消毒衣帽。
【火焰消毒】
在無菌環(huán)境進行培養(yǎng)或做其它無菌工作時,首先要點燃酒精燈或煤氣燈。以后一切操作,如按裝吸管帽、打開或封閉瓶口等,都需在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意:金屬器械不能在為焰中燒的時間過長,以防退火,燒過的金屬鑷要待冷卻后才能挾取組織,以免造成組織損傷。吸取過營養(yǎng)液后的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管頭中營養(yǎng)液能燒焦形成炭膜,再用時會把有害物帶入營養(yǎng)液中。開啟、關(guān)閉長有細(xì)胞的培養(yǎng)瓶時,火焰滅菌時間要短。防止因溫度過高燒死細(xì)胞。另外膠塞過火焰時也不能時間長,以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細(xì)胞。
【操作】
進行培養(yǎng)時,動作要準(zhǔn)確敏捷,但又不必太快,以防空氣流動,增加污染機會。不能用手觸及已消毒器皿,如已接觸,要用火焰燒灼消毒或取備品更換。為拿取方便,工作臺面上的用品要有合理的布局,原則上應(yīng)是右手使用的東西放置在右側(cè),左手用品在左側(cè),酒精燈置于中央。工作由始至終要保持一定順序性,組織或細(xì)胞在未做處理之前,勿過早暴露在空氣中。同樣,培養(yǎng)液在未用前,不要過早開瓶;用過之后如不再重復(fù)使用,應(yīng)立即封閉瓶口直立可增加落菌機會。吸取營養(yǎng)液、PBS、細(xì)胞懸液及其它各種用液時,均應(yīng)分別使用吸管,不能混用,以防擴大污染或?qū)е录?xì)胞交叉污染。工作中不能面向操作野講話或咳嗽,以免唾沫把細(xì)菌或支原體帶入工作臺面發(fā)生污染。操作前用酒精擦拭超凈臺面及雙手。手或相對較臟的物品不能經(jīng)過開放的瓶口上方,瓶口zui易污染,加液時如吸管尖碰到瓶口,則應(yīng)將吸管丟掉。
大鼠垂體瘤細(xì)胞GH3
大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞C6
大鼠雪旺細(xì)胞RSC96
大鼠骨髓瘤細(xì)胞Y3-Ag1.2.3
大鼠纖維母細(xì)胞1/EJ 1-1
大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞RS1
大鼠肌肉成纖維樣細(xì)胞RM1
大鼠骨髓瘤細(xì)胞IR983F
大鼠成肌細(xì)胞L6
大鼠骨肉瘤細(xì)胞UMR-106
大鼠乳腺腺癌細(xì)胞MADB106
大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞INS-1
大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞RIN-m5F
大鼠胰腺外分泌細(xì)胞AR42J
大鼠乳腺癌細(xì)胞SHZ-88
大鼠腹水癌細(xì)胞Walker/LLC-WRC 256
大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞RBL-1
黃胸鼠肺成纖維細(xì)胞YCR
中國倉鼠肺細(xì)胞V79
中國倉鼠肺細(xì)胞CHL
黑化大家鼠肺成纖維細(xì)胞NRm
水貂肺上皮細(xì)胞MV-1-Lu
恒河猴肺細(xì)胞RM-L1
豚鼠肺細(xì)胞GP-F1
小耳豬肺細(xì)胞SEP-L1
小耳豬肺細(xì)胞SEP-L2
家貓肺細(xì)胞]FCA-L1
家貓肺細(xì)胞FCA-L2
大耳山羊肺細(xì)胞LDG-1
綿羊肺細(xì)胞OAR-L1
大額牛肺細(xì)胞BFR-L1
狗肺成纖維樣細(xì)胞DogL1
赤狐肺成纖維樣細(xì)胞RFL1
赤狐肺成纖維樣細(xì)胞RF-88L
果子貍肺成纖維樣細(xì)胞MPCL1
樹鼩胎心成纖維樣細(xì)胞TS-EH-1
豬髖動脈內(nèi)皮細(xì)胞PIEC
樹鼩胎心成纖維樣細(xì)胞TS-EH-1
豬髖動脈內(nèi)皮細(xì)胞PIEC
章魚肝臟細(xì)胞L8824
草魚腎細(xì)胞CY-2
牛腎細(xì)胞MDBK
非洲綠猴腎細(xì)胞VERO
敘利亞倉鼠腎細(xì)胞BHK-21
非洲綠猴腎細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化)COS-7
恒河猴腎細(xì)胞RM-1
恒河猴腎細(xì)胞MMK2
恒細(xì)胞河猴腎MMK3
家貓腎細(xì)胞CATK1
大耳山羊腎細(xì)胞LDG-2
大耳山羊腎細(xì)胞LDG-3
恒河猴腎細(xì)胞RM-2
恒河猴腎細(xì)胞RM-3
大額牛腎細(xì)胞BFR-K1
赤狐腎上皮樣細(xì)胞RF-88K
花鼠腎上皮樣細(xì)胞CHPK3
樹鼩腎上皮樣細(xì)胞TSHK3
山羊腎上皮樣細(xì)胞DG-K1
貓星形腦膠質(zhì)細(xì)胞PG-4(S+L-)
骨、關(guān)節(jié)、肌肉、皮膚系統(tǒng)
豚鼠皮膚細(xì)胞GP-S1
豚鼠皮膚細(xì)胞GP-S2
豚鼠皮膚細(xì)胞GP-S3
敘利亞倉鼠肌肉細(xì)胞GH-M1
敘利亞倉鼠皮膚細(xì)胞GH-S1
家豬皮膚細(xì)胞SSC-S1
小香豬皮膚細(xì)胞SSC-S2
家貓皮膚細(xì)胞FCA-S1
綿羊皮膚細(xì)胞OAR-S1
恒河猴皮膚細(xì)胞RM-S1
家兔皮膚細(xì)胞DR-S1
大額牛皮膚細(xì)胞BFR-S3
黃牛皮膚細(xì)胞BTA-S2
瘤牛皮膚細(xì)胞BIN-S1
牦牛皮膚細(xì)胞BMU-S1
赤狐皮膚成纖維樣細(xì)胞RF-88S
豹貓肌肉成纖維樣細(xì)胞LCM4
豹貓皮膚成纖維樣細(xì)胞LCS5
豚鼠皮膚細(xì)胞GP-S1
豚鼠皮膚細(xì)胞GP-S2
豚鼠皮膚細(xì)胞GP-S3