細(xì)胞:MDCK-2細(xì)胞
中文名稱:狗腎細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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細(xì)胞的生命周期是受某種方式所控制的——一種叫做細(xì)胞程序性死亡的機(jī)制。除了供應(yīng)能量外,線粒體也擔(dān)負(fù)著確保細(xì)胞程序性死亡信號(hào)的整合和擴(kuò)大的功能。
(小鼠3T3-L1細(xì)胞 小鼠成纖維細(xì)胞)(人BeWo細(xì)胞 人胎盤絨膜癌細(xì)胞)
從De Strooper和 Scorrano的研究來(lái)看,PARL蛋白在線粒體中啟動(dòng)了細(xì)胞程序性死亡。盡管PARL敲除小鼠的線粒體能正常發(fā)育并且能將氧轉(zhuǎn)換成能量,但是它們已經(jīng)喪失了抵抗程序性死亡的能力,并且細(xì)胞死亡得更快。
(猴COS-1細(xì)胞 猴腎細(xì)胞)(人HCT 116細(xì)胞 結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)
因此,PARL蛋白在細(xì)胞死亡的過(guò)程中起著至關(guān)重要的作用,并且很可能在像帕金森等衰老疾病的起源具有重要作用。