人胚腎細(xì)胞293細(xì)胞 酶免疫技術(shù)的分類
酶免疫技術(shù)是以酶標(biāo)記的抗體或抗原為主要試劑的方法，是標(biāo)記免疫技術(shù)的一種。近年來標(biāo)記免疫技術(shù)飛速發(fā)展，應(yīng)用不同標(biāo)記物，根據(jù)不同原理、不同技術(shù)建立起來的檢測方法層出不窮，而方法的創(chuàng)建者往往給同類的方法以不同的名稱。因此確知某一方法屬于哪一類型，對該方法的正確理解有著重要意義。本節(jié)先敘述各種標(biāo)記免疫技術(shù)的要點，然后介紹酶免疫技術(shù)的分類，這樣可以對酶免疫技術(shù)和其他非酶的標(biāo)記免疫技術(shù)的各種類型有一個總的概念。
一、標(biāo)記的免疫技術(shù)
人胚腎細(xì)胞293細(xì)胞 酶免疫技術(shù)的分類 免疫技術(shù)是利用抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行的檢測方法，即應(yīng)用制備好的特異性抗原或抗體作為試劑，以檢測標(biāo)本中的相應(yīng)抗體或抗原。它的特點是具有高度的特異性和敏感性。如將試劑抗原或試劑抗體用可以微量檢測的標(biāo)記物（例如放射性核素、熒光素、酶等）進(jìn)行標(biāo)記，則在與標(biāo)本中的相應(yīng)抗體或抗原反應(yīng)后，可以不必測定抗原抗體復(fù)合物本身，而測定復(fù)合物中的標(biāo)記物，通過標(biāo)記物的放大作用，進(jìn)一步提高了免疫技術(shù)的敏感性。這種標(biāo)記免疫技術(shù)一般分為兩類，一類用于組織切片或其他標(biāo)本中抗原或抗體的定位，另一類用于液體標(biāo)本中抗原或抗體的測定。前者屬于免疫組化技術(shù)（immunohistochemicaltechnique）范疇，后者則稱為免疫測定（immunoassay）。
人胚腎細(xì)胞293
人胚腎細(xì)胞APP-PS1
人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞HK-2
人胚腎上皮細(xì)胞HKC
人胚胎膀胱組織來源細(xì)胞CCC-HB-2
人胚腎細(xì)胞（SV40T基因修飾）293T/17
人胚腎細(xì)胞（293來源病毒包裝細(xì)胞）ΦA
人膀胱移行細(xì)胞癌SW 780
人二倍體細(xì)胞HEL
人胚腎上皮細(xì)胞系KiMA
人胚腎二倍體細(xì)胞HEL-1
人胚腎細(xì)胞（SV40T基因修飾）293T
人胚胎腎細(xì)胞（Asp-2基因修飾）FC33
人胚胎腎細(xì)胞（Rabll-FIP基因修飾）FIP293
人胚腎細(xì)胞（EBNA1基因修飾）293E
人胚腎細(xì)胞（SV40T和 EBNA1基因修飾細(xì)胞）293ET
人胚腎細(xì)胞（小鼠 MHCⅠ類分子 Kb基因修飾細(xì)胞）293KB
人胚腎細(xì)胞（Sars結(jié)構(gòu)蛋白基因修飾）293 001A
人胚腎細(xì)胞（Sars結(jié)構(gòu)蛋白基因修飾）293 001B
人胚腎細(xì)胞（Sars結(jié)構(gòu)蛋白基因修飾）293sars181A
人胚腎細(xì)胞293FT
腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞AA V-293
人原胚腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞293 Ad5
人腎癌 Wilms細(xì)胞G401
人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞SW-13
人腎癌細(xì)胞A498
人膀胱癌細(xì)胞
人膀胱移行細(xì)胞癌J82
人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞NCI-H295R
人腎上腺腺瘤細(xì)胞NCI-H205
人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞T24
人腎癌細(xì)胞769-P
人腎上腺癌細(xì)胞ACHN
人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞Caki-2
人膀胱癌細(xì)胞J82
人膀胱癌細(xì)胞5637（HTB-9）
人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞786-O
人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞KP-N-NS
人腎癌細(xì)胞OS-RC-2
人膀胱移行細(xì)胞癌M-UC-3
人膀胱鱗癌細(xì)胞SCaBER
人腎透明細(xì)胞癌Caki-1
人膀胱移行細(xì)胞乳頭瘤細(xì)胞RT4
人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞769-P
人腦瘤細(xì)胞SF126
人腦瘤細(xì)胞SF763
人腦瘤細(xì)胞SF767
人絨癌細(xì)胞耐藥株JEG-3/VP16
耐 VP16絨癌細(xì)胞（IL-2基因修飾）JEG-3/VP16-IL-2
耐 VP16絨癌細(xì)胞（TNFα基因修飾）JEG-3-VP16-TNFa
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞BE（2）-M17
人腦瘤細(xì)胞SF17
人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞U-87 MG
人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞D283
人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞HS 683
人膠質(zhì)瘤細(xì)胞SHG-44
人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞SK-N-MC
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SK-N-SH
人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞U251
人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞A172
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SH-SY5Y
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞IMR-32
首先被用作標(biāo)記免疫技術(shù)中標(biāo)記物的是熒光素。1941年Coons建立的熒光抗體技術(shù)（fluorescentantibodytechnique）使組織和細(xì)胞中抗原物質(zhì)的定位成為可能。放射性核素作為標(biāo)記物在免疫技術(shù)中的應(yīng)用又開創(chuàng)了特異性的超微量測定。1956年Yalow和Berson建立的放射免疫測定（radioimmunoassay，RIA）很快普遍應(yīng)用于體液中的激素、微量蛋白及藥物的測定。酶用作免疫技術(shù)標(biāo)記物是從抗原定位開始的。1966年Nakene和Pierce利用酶使底物顯色的作用而得到與熒光抗體技術(shù)相似的結(jié)果。70年代初，酶標(biāo)抗體技術(shù)開始應(yīng)用于免疫測定，其后得到迅速發(fā)展。
人胚腎細(xì)胞293細(xì)胞 酶免疫技術(shù)的分類熒光抗體技術(shù)、放射免疫分析和酶免疫技術(shù)，即經(jīng)典的三大標(biāo)記技術(shù)，又可根據(jù)標(biāo)記物是否為放射性物質(zhì)分為放射性免疫測定和非放射性免疫測定兩大類。后者消除了應(yīng)用放射性物質(zhì)在測定中帶來的不便，受到使用者的歡迎，新的方法不斷出現(xiàn)?；瘜W(xué)發(fā)光免疫技術(shù)和金免疫技術(shù)等得到很大的發(fā)展。這些方法已普遍應(yīng)用于臨床檢測驗。
二、酶免疫技術(shù)的分類
酶免疫技術(shù)一般分成酶免疫組化技術(shù)和酶免疫測定兩大類。酶免疫組化技術(shù)與熒光抗體技術(shù)相似，酶標(biāo)記抗體與組織切片上的抗原起反應(yīng)，然后與酶底物作用，形成有色沉淀物，可以在普通光學(xué)顯微鏡下觀察。如酶作用的產(chǎn)物電子密度發(fā)生一定的改變，則可用電子顯微鏡觀察，稱為酶免疫電鏡技術(shù)。
酶免疫測定根據(jù)抗原抗體反應(yīng)后是否需要分離結(jié)合的與游離的酶標(biāo)記物而分為均相（homogenous）和異相（heterogenous）兩種類型，實際上所有的標(biāo)記免疫測定均可分成這兩類。如以標(biāo)記抗體檢測標(biāo)本中的抗原為例，按照簡單的形式是在試劑抗體過量的情況下進(jìn)行，其反應(yīng)式如下：
Ab*＋Ag→Ab*Ag＋Ab*
Ab*Ag代表結(jié)合的標(biāo)記物，Ab*為游離的標(biāo)記物。如在抗原反應(yīng)后，先把Ab*Ag與Ab*分離，然后測定Ab*Ag或Ab*中的標(biāo)記物的量，從而推算出標(biāo)本中的抗原量，這種方法稱為異相法。如在抗原抗體反應(yīng)后Ab*Ag中的標(biāo)記物*失去其特性，例如酶失去其活力，熒光物質(zhì)不顯熒光，則不需要進(jìn)行Ab*Ag與Ab*的分離，可以直接測定游離的Ab*量，從而推算出標(biāo)本中的Ag含量，這種方法稱為均相法。
在異相法中，抗原和抗體如在液體中反應(yīng)，分離游離和結(jié)合的標(biāo)記物的方法有好多種。與放射免疫測定相類似的液相異相酶免疫技測定，在某些激素等定量測定中也有應(yīng)用。但常用的酶免疫測定法為固相酶免疫測定。其特點是將抗原或抗體制成固相制劑，這樣在與標(biāo)本中抗體或抗原反應(yīng)后，只需經(jīng)過固相的洗滌，就可以達(dá)到抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)的分離，大大簡化了操作步驟。這種被稱為ELISA的檢測技術(shù)成為目前臨床檢驗中應(yīng)用較廣的免疫測定方法。
