mMSCs細胞（小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞）

時間：2025/5/21閱讀：40

細胞：mMSCs細胞

中文名稱：小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞

生長特性：貼壁細胞

培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請嚴格遵照無菌操作）

1．吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞（注意把握消化時間，通?？刂圃?1-2min）

2．鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細胞漂?。┤サ粢萠酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散。

3．取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4．注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細胞密度達到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員，以細胞庫管理員提供給您的信息為準，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細胞庫管理員，避免不必要的損失；）

內(nèi)皮抑素(endostatin)一種具有抑制血管生長的蛋白質(zhì).

休眠蛋白(restin)是內(nèi)皮抑素的同源蛋白質(zhì),它來源于膠原蛋白XV的羧端非膠原蛋白結(jié)構(gòu)域(NC1)。

為了研究鼠源休眠蛋白對內(nèi)皮細胞生長的影響, 利用RT-PCR從鼠肌肉中擴增出它的基因, 克隆入原核表達載體pQE32。

誘導(dǎo)后, 重組蛋白質(zhì)以包涵體形式高效表達, 表達量約占菌體總蛋白質(zhì)的60%～70%。

重組蛋白質(zhì)經(jīng)純化復(fù)性后, 可以特異地抑制bFGF刺激的牛主動脈內(nèi)皮細胞的增殖, 但是休眠蛋白的抑制活性比內(nèi)皮抑素活性稍低.

流式細胞儀檢測發(fā)現(xiàn), 休眠蛋白可以引起內(nèi)皮細胞的細胞周期的改變, 并且引起細胞凋亡。

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