ATCC細胞培養(yǎng)在臨床診斷中應用
（一） ATCC細胞細胞培養(yǎng)在臨床病原學診斷中應用
臨床上多種病原生物如病毒、立克次體、衣原體、胞內寄生的細菌、原蟲等的分離培養(yǎng)和藥物敏感試驗是通過細胞培養(yǎng)技術完成的，如人免疫缺陷病毒（HIV）和新近出現(xiàn)的嚴重急性呼吸綜合征（SARS）病毒等就是通過細胞培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)的。臨床應用微量全血培養(yǎng)技術診斷HIV的感染，已用于兒童HIV垂直感染的早期診斷及可疑感染者的確認。
1． 病毒的分離的常用細胞
ATCC細胞 對病毒性疾病的病原學診斷，zui可靠的方法是從標本中分離并鑒定出致病性病毒。由于病毒具有嚴格的細胞內寄生性，對病毒的分離培養(yǎng)必須選用敏感的細胞，包括動物、雞胚和細胞培養(yǎng)。目前zui被廣泛采用的方法就是細胞培養(yǎng)技術。用于病毒分離的細胞種類很多，由于不同種類病毒對細胞的敏感性不同，因此首先應根據(jù)病毒的種類選擇敏感細胞進行分離培養(yǎng)。細胞的種類按其來源、染色體特征及傳代次數(shù)等可分為原代細胞、二倍體細胞及傳代細胞3種類型。但由于原代細胞只能傳1～3代，器官來源、操作繁鎖等問題使該方法應用受限，而二倍體細胞和傳代細胞，由于可以長期傳代、培養(yǎng)方便，故較為常用。
ATCC細胞2． 體外抗病毒藥效試驗
抗病毒藥效測定試驗分為體內試驗和體外試驗。體外試驗是采用組織細胞培養(yǎng)法來觀察藥物的抗病毒作用。在實驗中要根據(jù)藥物的特性來選擇病毒；根據(jù)病毒對細胞易感性選擇所用細胞；觀察藥效指標常采用病毒致細胞病變（CPE）情況來判定藥物的抗病毒效果。下面以抗呼吸道病毒藥物為例采用微量細胞培養(yǎng)法介紹藥物體外抑病毒試驗方法。
?。ǘ?細胞培養(yǎng)在臨床腫瘤診斷中的應用
1．腫瘤細胞端粒與端粒酶活性檢測
真核細胞染色體末端含有串連重復的DNA序列，稱為特殊的DNA一蛋白質端粒結構。當正常體細胞分裂時，端粒的末端均會隨每次的復制被逐漸縮短，端粒的定長可能與正常細胞的有限分裂代數(shù)（約50代左右）有關，待端粒結構縮短至zui后時，細胞即不再能分裂，這從整體上也限制了機體壽命的長短。原核細胞、真核細胞中的某些種系，很多腫瘤細胞等獲得了不死性，說明它們具有延長端粒的性能，能將新生的重復序列加到染色體的末端，這就是端粒酶（omerase）的作用。人的正常體細胞無端粒酶活性，這些酶的重新活化可能使細胞獲得了無限分裂的能力，故端粒酶的活性檢測，可被作為惡性腫瘤細胞增殖、轉移的潛在標記。
2．腫瘤細胞與細胞凋亡
細胞凋亡是細胞在一定的生理或病理條件下，遵循自身的程序去結束生命的過程。這是保證多細胞生物個體正常發(fā)育、成熟和維持生理過程所必需的?，F(xiàn)已知，細胞凋亡作為一種細胞內源性基因調控下的生理性死亡方式，此過程如發(fā)生障礙，不僅能成為腫瘤發(fā)生的主要機制之一，而且也與腫瘤的治療和耐藥性的形成密切相關。目前認為多種化學結構不同、作用機制各異的抗腫瘤藥物，均可誘導腫瘤細胞逆轉出現(xiàn)凋亡。因此，掌握細胞凋亡的檢測方法，不僅可篩選抗腫瘤藥物，而且可用以研究腫瘤的發(fā)生及消亡機制。
3．腫瘤細胞體外藥物敏感性檢測
化學療法是治療惡性腫瘤的主要手段之一，但臨床醫(yī)師普遍存在著盲目用抗癌藥的情況。為提供合理用藥的科學依據(jù)，利用來源于手術切除或活檢組織中分離的腫瘤細胞，進行抗癌藥物敏感性測定，可為臨床醫(yī)生合理選擇有效藥物提供參考，現(xiàn)介紹幾種常用的方法。
（三）細胞培養(yǎng)在臨床病因診斷中的應用
由于對造血干細胞的研究取得成功，故臨床上利用造血細胞培養(yǎng)作為造血干細胞克隆性疾病的診斷和療效分析的常用方法。造血干細胞約占細胞總數(shù)的0.4%，可向多種定向祖細胞分化增殖，所以不同類型的造血干細胞克隆性疾病，如骨髓增生異常綜合征（MDS）、急、慢性白血?。ˋML、CML）、再生障礙性貧血（AA）、骨髓增生性疾病等，其造血細胞的集落分析均有一定特點，如重癥再生障礙性貧血患者的骨髓、外周血培養(yǎng)幾乎都無集落形成，可能與混合集落形成細胞（cfu-MIX）培養(yǎng)階段發(fā)生障礙有關。另一項專門技術是用來診斷與染色體變化相關的疾病，如判定和發(fā)現(xiàn)染色體結構和數(shù)目異常的綜合征。取自骨髓、外周血、絨毛膜、羊水中胎兒脫落細胞和臍血、皮膚等各種組織，使這些細胞在一定條件下培養(yǎng)，使之大部分細胞處于有絲分裂并停止在分裂中期相，進一步使細胞核體積脹大，以利于進行染色體分析。染色體分析是產(chǎn)前診斷的主要內容之一，此外臨床上更多的是用于細胞遺傳學診斷并成為臨床診斷白血病、判斷預后和觀察治療效果的重要方法學。（見產(chǎn)前診斷、遺傳病實驗診斷等相關章節(jié)）。
（四）在臨床實驗診斷中對細胞培養(yǎng)技術應用的評價
1．培養(yǎng)技術繁雜，需具備一定的實驗條件才能開展。
2．細胞培養(yǎng)技術在某些方面的應用是不可替代的。如分離培養(yǎng)病毒等細胞內寄生的病原體。
3．細胞在體外培養(yǎng)，由于環(huán)境及條件的局限性，應避免將體外培養(yǎng)細胞的實驗結果機械地看作體內同種細胞性狀的必然反映。如體外篩選的抗病毒藥物或抗腫瘤藥物，在體外有效不等于在體內就一定有效。
4．細胞培養(yǎng)技術的臨床應用方興未艾，地、市級以上的醫(yī)院里應積極創(chuàng)造條件建立細胞培養(yǎng)實驗室，開展對病毒、腫瘤等實驗診斷工作，以體外實驗結果輔助體內的各項檢查。
5．細胞培養(yǎng)技術與分子生物學技術、信息學和計算機技術等結合，在細胞水平與分子水平之間互動，在研究生命活動規(guī)律和診斷疾病方面將發(fā)揮更大的作用。
