細(xì)胞：JF1細(xì)胞

中文名稱：大鼠肉瘤細(xì)胞

生長特性：貼壁細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（ 請嚴(yán)格遵照無菌操作）

1． 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時間，通?？刂圃?1-2min）

2． 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ粢萠酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。

3． 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4． 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；）

與胚胎干細(xì)胞相比，成體干細(xì)胞具有許多優(yōu)勢：

胚胎干細(xì)胞具有全能性和可以建系傳代等優(yōu)點(diǎn)，理論應(yīng)用前景廣闊。但實(shí)際上由于每個個體的主要組織相容性復(fù)合體（MHC）不同，同種異體胚胎干細(xì)胞及其分化組織細(xì)胞用于臨床會引起免疫排斥，因此基于胚胎干細(xì)胞的治療方案要求對患者進(jìn)行長期免疫抑制劑治療或?qū)⒒颊叩脑煅到y(tǒng)和外來細(xì)胞形成嵌合體。

研究證實(shí)：人胚胎干細(xì)胞能誘導(dǎo)分化成為造血細(xì)胞，但小鼠胚胎干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)表明：

來源于胚胎干細(xì)胞的造血細(xì)胞在體內(nèi)無法重建造血機(jī)制，因而限制了臨床應(yīng)用。為了解決免疫排斥的問題，研究人員探索將患者的體細(xì)胞核移植到去核的健康供體卵細(xì)胞中，在體外克隆并隨后發(fā)育分化產(chǎn)生攜帶患者自己MHC的胚胎干細(xì)胞。

這些胚胎干細(xì)胞及其衍生組織移植后不會產(chǎn)生免疫排斥，因此可以用于患者病變組織及其功能的重建，這就是治療性克隆。

但一些研究觀察：胚胎干細(xì)胞發(fā)育分化過程中具有極_高的非整倍體發(fā)生率，克隆動物的基因在構(gòu)成沒有缺陷的情況下，也不能像正常動物基因一樣準(zhǔn)確表達(dá)出來。

BGC-823細(xì)胞  BGC823細(xì)胞胃腺癌細(xì)胞種屬：人

BV2細(xì)胞                膠質(zhì)細(xì)胞種屬:小鼠

CV-1細(xì)胞 CV1細(xì)胞        腎細(xì)胞        種屬：猴

正是這個原因，造成現(xiàn)在98％的動物克隆實(shí)驗(yàn)失敗，而順利降生的克隆動物也經(jīng)常出現(xiàn)體重超重等異常。研究還發(fā)現(xiàn)，利用目前的克隆技術(shù)取患者體細(xì)胞核的細(xì)胞克隆培育出來的新組織一樣會存在缺陷，這項(xiàng)技術(shù)還有待完善、成熟。

體細(xì)胞克隆所需的卵細(xì)胞難以獲得，成體干細(xì)胞則可從患者自身獲得，而不存在組織相容性的問題，治療時可避免長期應(yīng)用免疫抑制劑對患者的傷害。此外，少量的骨髓切除治療有助于形成部分造血嵌合，可使異體成體干細(xì)胞的治療成為可能。