細胞:HTR-8細胞
中文名稱:人絨毛膜滋養(yǎng)層細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂?。┤サ粢萠酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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脂肪或起源于筋膜組織
筋膜是一種無處不在而且連續(xù)分布的膜狀結締組織,具有很強的韌性,包裹、分隔、支持和連接體內的各種器官及組織的表面與內部。生活中所見肉類含的膜即是筋膜。
以往的研究表明,脂肪細胞從被稱為脂肪前體細胞的干細胞演化而來。長期以來,人們期望找到脂肪組織以外的脂肪干細胞,以解釋脂肪的起源。
采用不同年齡大鼠的淺筋膜組織,發(fā)現(xiàn)筋膜含有大量脂肪干細胞,能自發(fā)地或經誘導分化為脂肪細胞。這些筋膜細胞表達一系列脂肪干細胞的標志性分子,并且是已經定向的脂肪前體細胞。
在出生后的發(fā)育成長過程中,筋膜血管周圍的脂肪前體細胞陸續(xù)分化為脂肪細胞,逐漸沿著血管形成二維的單層的脂肪細胞薄層;
隨后新生的微血管沿著脂肪細胞薄層向外、向前、向上方分枝延伸,其作用是繼續(xù)提供脂肪前體細胞、營養(yǎng)物質,刺激脂肪分化的激素和因子。
進而,一些新生的脂肪細胞出現(xiàn)在原脂肪細胞薄層上方,并不斷向上、向外堆積生長,逐漸形成三維的脂肪組織。
此后,原有的筋膜組織依其固有的組織學特性,將自發(fā)延伸進入剛形成的三維新生脂肪中,成為新生脂肪內部的筋膜,并在脂肪組織內繼續(xù)提供脂肪前體細胞,以保證新生脂肪組織的自我擴增。
筋膜是脂肪細胞起源的模型,揭示了脂肪組織從無到有、從單層到三維組織塊的動態(tài)發(fā)育過程,也解釋了脂肪組織的新生起源及隨后的自我擴增問題。