細(xì)胞：WRL-68細(xì)胞

中文名稱：人正常肝細(xì)胞

生長特性：貼壁細(xì)胞

培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基  血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（ 請嚴(yán)格遵照無菌操作）

1． 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min）

2． 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時(shí)（不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ魕i酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。

3． 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4． 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；）

調(diào)節(jié)細(xì)胞周期進(jìn)程(細(xì)胞分裂和復(fù)制的過程)中的一種蛋白質(zhì)，實(shí)際上激活一個(gè)關(guān)鍵的抑癌基因，而不是像以前認(rèn)為的那樣使它失活。(大鼠RIN-m5F細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 大鼠胰島素瘤上皮細(xì)胞)

促癌蛋白實(shí)際上激活抑癌基因,即一個(gè)稱為p16-細(xì)胞周期蛋白D通路(癌癥中最常見的遺傳通路突變)促進(jìn)所有腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期進(jìn)程的一個(gè)基本方面。（人BT474細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 人乳癌細(xì)胞）

細(xì)胞周期蛋白D是在細(xì)胞復(fù)制的第一階段期間合成的，被認(rèn)為有助于促進(jìn)復(fù)雜的，多階段的過程，其中包括與視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤(Rb)蛋白的相互作用，Rb蛋白的功能是通過抑制細(xì)胞周期進(jìn)程防止細(xì)胞過度生長，直到細(xì)胞準(zhǔn)備分裂。RB是一個(gè)抑癌基因。（人H1975細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞）

幾個(gè)主要的癌癥相關(guān)的Rb突變和功能失調(diào)，以及細(xì)胞周期蛋白D一直被描述為促進(jìn)癌癥的一個(gè)致癌基因，因?yàn)樗徽J(rèn)為是通過一種叫做磷酸化的過程，使Rb的抑癌功能失活。（人REH細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 人急性非B非T淋巴細(xì)胞性白血病細(xì)胞）

精心計(jì)算細(xì)胞周期進(jìn)程期間的磷酸鹽添加到Rb的數(shù)量。這多達(dá)14個(gè)，但發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞周期蛋白D只增加了一個(gè)單磷酸，且只有細(xì)胞周期進(jìn)程的早期G1期的14個(gè)位點(diǎn)中的一個(gè)，基本上有14個(gè)不同亞型的Rb。單磷酸鹽的作用是激活RB，不使它失活，這個(gè)認(rèn)知已超過了20年。（小鼠OP9細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 小鼠顱蓋成纖維細(xì)胞）

這項(xiàng)研究從根本上改變了對G1期細(xì)胞周期調(diào)控和許多癌癥相關(guān)的分子起源的理解。非常重要的是要明白一個(gè)基因通路的實(shí)際功能和中斷它的后果，尤其是細(xì)胞周期蛋白D的多種藥物抑制劑用于乳癌的臨床試驗(yàn)測試這種情況下。