細(xì)胞：H4細(xì)胞

中文名稱：人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞

生長特性：貼壁細(xì)胞

培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基  血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

H4細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（ 請嚴(yán)格遵照無菌操作）

1． 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細(xì)胞（注意把握消化時間，通?？刂圃?1-2min）

2． 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ魕i酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。

3． 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4． 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細(xì)胞密度達到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；）

哺乳動物缺失模型對miRNA靶標(biāo)研究有效

miRNAs是一種21－25nt長的單鏈小分子RNA，對于它的研究起始于時序調(diào)控小RNA（stRNAs），由于miRNAs在物種進化中相當(dāng)保守

在植物、動物和真菌中發(fā)現(xiàn)的miRNAs只在特定的組織和發(fā)育階段表達，（人AU565細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 人乳癌細(xì)胞）而且這種特異性和時序性，決定了組織和細(xì)胞的功能特異性，表明miRNA在細(xì)胞生長和發(fā)育過程的調(diào)節(jié)過程中起多種作用，因此miRNA的研究受到了生物學(xué)家的廣泛關(guān)注。

但是經(jīng)過了前期的研究，（人HMSC細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 人間充干細(xì)胞）有關(guān)哺乳動物體內(nèi)特異性miRNAs靶向刪除必要性仍然知之甚少，并對于mRNA靶標(biāo)的可靠預(yù)測依然存在問題

研究人員提出miRNA生物生成對于小鼠心臟發(fā)生而言是必需的，（人HPDLF細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 人牙髓成纖維細(xì)胞）而且在對肌肉特異性miRNA：miR-1-2的研究中，他們發(fā)現(xiàn)miR-1-2參與扮演的角色眾多，包括心肌形態(tài)形成（cardiac morphogenesis），電傳導(dǎo)，細(xì)胞周期調(diào)控。

進一步對miR-1互補序列進行分析，（人Calu-3細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 人肺腺癌細(xì)胞 ）發(fā)現(xiàn)了一個miR-1匹配點（seed matches）富集區(qū)，以及miR-1潛在結(jié)合位點定位在物理性可接觸區(qū)域的一種傾向。

這些發(fā)現(xiàn)說明miRNA數(shù)量的精細(xì)差別在哺乳動物中有重要的影響，并且哺乳動物缺失模型在miRNA靶標(biāo)研究方面的有效性。