細(xì)胞:AR42J細(xì)胞
中文名稱:大鼠胰腺外分泌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
AR42J細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ魕i酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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丙酮酸脫氫酶可從線粒體跳躍到細(xì)胞核中
在細(xì)胞核中DNA纏繞著稱之為組蛋白的特殊蛋白質(zhì)。通常情況下,組蛋白使得DNA緊密包裝,阻止了基因表達(dá)和DNA復(fù)制,后兩者是細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂的必要條件。
為了讓這些至關(guān)重要的功能得以執(zhí)行,(人BT-B細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人膀胱癌細(xì)胞)需要由一種叫做乙酰輔_酶A(acetyl-CoA)的關(guān)鍵分子提供乙?;街浇M蛋白上對(duì)其進(jìn)行修飾。這種附著使得DNA松弛,允許DNA復(fù)制和基因表達(dá)。
這一稱作為“DNA表觀遺傳調(diào)控"的機(jī)制對(duì)于正常的功能,(人SBC-2細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)以及心臟衰竭或癌癥等常見(jiàn)疾病均極為重要。然而直到現(xiàn)在,對(duì)于細(xì)胞核生成組蛋白乙?;璧囊阴]o_酶A的機(jī)制仍不清楚。
研究發(fā)現(xiàn)過(guò)去被認(rèn)為僅定位在線粒體內(nèi)的一種酶: (人Hacat細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人永生化表皮細(xì)胞)丙酮酸脫氫酶復(fù)合體(PDC)實(shí)際上可以進(jìn)入到細(xì)胞核中,完成它在線粒體中所做的事情:生成乙酰輔_酶A。
在線粒體中時(shí),(小鼠H22細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 小鼠肝癌細(xì)胞)PDC利用我們飲食中的碳水化合物來(lái)生成乙酰輔_酶A是為了產(chǎn)生能量。而在細(xì)胞核中,PDC生成乙酰輔_酶A是為了實(shí)現(xiàn)組蛋白乙?;?。