細(xì)胞:D407細(xì)胞
中文名稱:人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
D407細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ魕i酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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Nature干細(xì)胞殺手
只要有一個(gè)外來細(xì)胞出現(xiàn)在人類胚胎干細(xì)胞(HESCs)中,就足以導(dǎo)致胚胎干細(xì)胞在移植時(shí)被宿主的免疫系統(tǒng)殺。
HESCs具有發(fā)育成各類細(xì)胞的潛力,(通派細(xì)胞庫供應(yīng):T-47D細(xì)胞)因此它們是組織移植的候選者。
HESCs主要是在源自動(dòng)物的“血清置換液"中培養(yǎng),(通派細(xì)胞庫供應(yīng):SHG44細(xì)胞)這種培養(yǎng)液也是硅鋁酸分子Neu5Gc的來源,但許多人類的循環(huán)抗體都會(huì)對(duì)付Neu5Gc分子。
HESCs在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)液中會(huì)混合相當(dāng)數(shù)量的Neu5Gc。(通派細(xì)胞庫供應(yīng):Jurkat細(xì)胞)這些細(xì)胞被置入人的血清中,會(huì)導(dǎo)致Neu5Gc抗體的出現(xiàn),最終在活機(jī)體內(nèi)殺死HESCs。
研究人員因此認(rèn)為,如果要全部清除Neu5Gc,(通派細(xì)胞庫供應(yīng):LLC細(xì)胞)就需要用人的血清培養(yǎng)液代替動(dòng)物的“血清置換液",這樣HESCs的培養(yǎng)過程就不會(huì)接觸任何動(dòng)物產(chǎn)品。