細(xì)胞:HO-8910PM細(xì)胞
中文名稱:人卵巢癌細(xì)胞
生長特性:貼壁細(xì)胞
HO-8910PM細(xì)胞培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ魕i酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員,以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫管理員,避免不必要的損失;)
實驗發(fā)現(xiàn),只有那些約3.5天后感染的細(xì)胞會產(chǎn)生IL-10。隨后的實驗表明,本質(zhì)上,暴露于病毒是沒有必要的,而是幾輪復(fù)制和增殖(約3天)能夠產(chǎn)生IL-10。
研究表明,無論是在體外條件下獨立的感染下,還是在體內(nèi)感染過程中,NK細(xì)胞的廣泛增殖與IL-10產(chǎn)生有關(guān);
(143B細(xì)胞:貼壁細(xì)胞通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:90% RPMI-1640、10% FBS)
IL-10的產(chǎn)生是與NK細(xì)胞的增殖有關(guān),觸發(fā)開關(guān)產(chǎn)生IL-10的NK細(xì)胞的機制。在感染的小鼠中,對NK細(xì)胞增殖前和后的全基因組的構(gòu)象進(jìn)行比較。
發(fā)現(xiàn)NK細(xì)胞尚未發(fā)生增殖過程時,IL-10基因被緊緊地包裹起來,而無法進(jìn)行表達(dá)。細(xì)胞進(jìn)行增殖時的IL-10基因被打開使其更容易表達(dá)。
(HEK-293細(xì)胞:貼壁細(xì)胞通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:90% DMEM、10% FBS)
當(dāng)?shù)玫竭@些結(jié)果時,大家都非常興奮,因為在體內(nèi)的感染過程中,從一個細(xì)胞群中挖掘表觀遺傳改變是相當(dāng)不俗的。
由于在在NK細(xì)胞的全基因組中的DNA研究表觀遺傳,而不僅僅是在IL-10基因中,研究人員現(xiàn)在可以返回尋找其他的增殖引起變化的數(shù)據(jù)中。這可能會告訴他們增殖是否改變NK細(xì)胞的其他重要功能。
(293FT細(xì)胞:貼壁細(xì)胞通派細(xì)胞庫培養(yǎng)條件:90% 高糖DMEM、10% FBS)
這是有可能其他的變化在進(jìn)行,以及它可能被用于其他目的,這也是NK細(xì)胞為什么增殖的一個答案。