細胞:Farage細胞
中文名稱:人B淋巴瘤細胞
生長特性:貼壁細胞
Farage細胞培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂?。┤サ魕i酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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未受精的卵子和胚胎干細胞可能包含一些成分,這些成分可以使已分化的細胞重新具有多能性。推測這些成分對維持胚胎干細胞的同一性至關重要,并且在誘導其它肌體細胞具有全能性的過程中扮演關鍵角色。(L6細胞\成肌細胞\種屬:大鼠)(HuT 78細胞\淋巴細胞\種屬:人)
研究人員選擇了先前已經(jīng)證實的與維持早期胚胎和胚胎干細胞同一性有關的24種基因作為候選因素,尋找能夠誘導肌體細胞轉(zhuǎn)化為其它細胞類型的關鍵因素。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)其中的四種基因:Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4可以使來自胚胎小鼠或者成年小鼠的不同的纖維原細胞保留胚胎干細胞正常的多能性。 (L1210細胞\淋巴細胞\種屬:人)
更進一步的實驗發(fā)現(xiàn),將這些ips細胞移植到小鼠的皮下組織會導致腫瘤發(fā)生,這些腫瘤包括在哺乳動物胚胎中三種重要類型組織腫瘤?!芭邔?最終會發(fā)育成為完整的組織和器官。將iPS細胞注入胚泡,也能發(fā)現(xiàn)iPS細胞協(xié)助小鼠胚胎發(fā)育。 LA795細胞\肺腺癌細胞\種屬:小鼠
這些結(jié)果為研究控制多能性邁出了重要一步,有助于將患者體內(nèi)細胞轉(zhuǎn)化為多能性細胞提供思路。因為這些研究結(jié)果有廣泛的應用價值,干細胞專家謹慎地表示此項胚胎干細胞研究還有很大的發(fā)展空間。 LtK-11細胞\結(jié)締組織細胞\種屬:小鼠
研究小組對干細胞將來的研究工作提出兩點意見:一是強調(diào)c-Myc(一種在多種人類癌癥中都出現(xiàn)的基因)也許不適合臨床應用,并且治療過程需要特定的培養(yǎng)環(huán)境;二是強調(diào)iPS細胞不一定具有胚胎干細胞所有功能。