細(xì)胞：RAEC細(xì)胞
中文名稱：大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁
RAEC細(xì)胞培養(yǎng)基：DMEM-L +10% FBS（GIBCO胎牛血清）
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換配套培養(yǎng)基，或自己配置的新鮮培養(yǎng)基（含15%血清），如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí)）。
RAEC細(xì)胞傳代：
1）：細(xì)胞密度約80%時(shí)，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意根據(jù)實(shí)際情況，把握消化時(shí)間）。
2）：鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)；
（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，即可肉眼可見細(xì)胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）
直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落，吹散。
3）：取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。
（網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；）
如何挽救線粒體發(fā)生功能障礙細(xì)胞；
為了發(fā)現(xiàn)可挽救這些細(xì)胞的遺傳突變，Chen和Birsoy在白頭研究所前任研究人員Thijn Brummelkamp開發(fā)的一個(gè)單倍體遺傳系統(tǒng)中，模仿線粒體功能障礙。他們用抗霉素(antimycin)抑制線粒體功能后，發(fā)現(xiàn)ATPIF1基因鈍化的突變細(xì)胞可免于線粒體功能喪失。
（人RD細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞）
atp酶抑制因子ATPIF1，是一個(gè)備份系統(tǒng)的一部分，可拯救饑餓的細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞喪失氧氣和糖分時(shí)，平時(shí)生產(chǎn)ATP的一個(gè)線粒體復(fù)合物(稱為ATP合成酶)，會(huì)轉(zhuǎn)變成消耗ATP，這種狀態(tài)對(duì)于一個(gè)已經(jīng)饑餓的細(xì)胞可能是有害的。
（人TE671細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人橫紋肌瘤細(xì)胞）
ATPIF1可與ATP合成酶相互作用，來(lái)關(guān)閉ATP合成酶，并阻止它消耗線粒體的ATP供應(yīng)，在這個(gè)過(guò)程中，線粒體膜電位也變得更壞。
（猴B95-8細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞）
在這些線粒體功能障礙疾病中，某種意義上，這種狀態(tài)對(duì)于細(xì)胞是一種虛假的饑餓狀態(tài)——其實(shí)有充足的養(yǎng)分，但是因?yàn)榫€粒體正常功能被阻斷，線粒體就表現(xiàn)的好像沒(méi)有足夠的氧氣一樣。
（人HC-A細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人軟骨細(xì)胞）
所以在這些情況下，激活A(yù)TPIF1并不好，因?yàn)橹車€有許多營(yíng)養(yǎng)可提供ATP。相反，阻斷ATPIF1則具有治療性，因?yàn)檫@能夠使膜電位得以維持。
（小鼠F9細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 小鼠畸胎瘤細(xì)胞）
具有嚴(yán)重線粒體疾病的患者其肝細(xì)胞經(jīng)常受到影響，所以Chen和Birsoy檢測(cè)了線粒體功能障礙在對(duì)照小鼠和ATPIF1敲除小鼠肝細(xì)胞中的影響。與具有正常ATPIF1活性的肝細(xì)胞相比，具有ATPIF1抑制功能的肝細(xì)胞，再次更好地應(yīng)對(duì)了線粒體功能障礙。
（人KP-N-NS細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞）
如果你擺脫了ATPIF1，你就會(huì)在線粒體功能障礙存在的情況下存活。根據(jù)目前為止我們所觀察到的結(jié)果，在小鼠中阻斷ATPIF1并沒(méi)有嚴(yán)重的副作用。
