細(xì)胞:NOZ細(xì)胞
中文名稱:人膽囊癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換配套培養(yǎng)基,或自己配置的新鮮培養(yǎng)基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過72小時(shí))。
NOZ細(xì)胞傳代:
1):細(xì)胞密度約80%時(shí),吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意根據(jù)實(shí)際情況,把握消化時(shí)間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí);
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,即可肉眼可見細(xì)胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。
3):取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫管理員,以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫管理員,避免不必要的損失;)
控制細(xì)胞分解葡萄糖(Glucose)的兩個(gè)蛋白質(zhì)對(duì)干細(xì)胞的形成非常重要。向基因組中插入了四個(gè)蛋白質(zhì)的基因,使成熟的人類細(xì)胞轉(zhuǎn)變成了類早期干細(xì)胞的狀態(tài),這一技術(shù)稱為細(xì)胞重編程(Reprogramming)。
(大鼠C6細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞)
重編程后的細(xì)胞有發(fā)育成任意類型細(xì)胞的能力,稱為細(xì)胞的多能性。人們一直希望由人類成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)化成的多能干細(xì)胞有朝一日能生成新的組織或器官,用以修復(fù)或替代人類的損傷組織或患病組織。
(大鼠RSC96細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 大鼠雪旺細(xì)胞)
細(xì)胞重編程過程中,它會(huì)關(guān)閉由葡萄糖產(chǎn)生能量的新陳代謝通路,該通路發(fā)生在有氧條件下的線粒體,繼而啟用無氧條件下的糖酵解通路。
(小鼠Ana-1細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 小鼠巨噬細(xì)胞)
能量產(chǎn)生通路的轉(zhuǎn)變對(duì)胚胎細(xì)胞和組織干細(xì)胞很重要,因?yàn)樗鼈儽仨氃诘脱醐h(huán)境下生存。研究通過對(duì)缺氧誘導(dǎo)因子1α和2α(Hypoxia-induced factor 1α and 2α,HIF1α和HIF2α)的功能缺失分析。
(人U-2 OS細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人骨肉瘤細(xì)胞)
研究發(fā)現(xiàn)這兩種蛋白質(zhì)對(duì)細(xì)胞重編程產(chǎn)生干細(xì)胞是必需的,會(huì)調(diào)控一些下游基因顯著改變細(xì)胞行為。為了更詳細(xì)地了解HIF1α和HIF2α對(duì)細(xì)胞的影響,分別激活其中一種,發(fā)現(xiàn)當(dāng)HIF1α單獨(dú)被激活時(shí),細(xì)胞進(jìn)入糖酵解通路,由此產(chǎn)生更多的誘導(dǎo)型多能干細(xì)胞。
(小鼠MFC細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 小鼠胃癌細(xì)胞)