細胞:MAEC細胞
中文名稱:小鼠主動脈內皮細胞
生長特性:貼壁
MAEC細胞培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
MAEC細胞凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
收到細胞后請盡快更換配套培養(yǎng)基,或自己配置的新鮮培養(yǎng)基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時)。
MAEC細胞傳代:
1):細胞密度約80%時,吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意根據(jù)實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時;
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處,即可肉眼可見細胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。
3):取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
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研究通過一系列體外實驗,鑒定了19個轉錄因子。這些轉錄因子在人類膠質母細胞瘤干細胞中的表達水平,顯著高于其他更為分化的腫瘤細胞。
【小鼠NIH 3T3細胞 來源:通派細胞庫 小鼠成纖維細胞】
隨后研究對這些因子逐個進行測試,檢測它們將已分化腫瘤細胞誘導回干細胞狀態(tài)的能力。最終他們確定了四種關鍵的轉錄因子,POU3F2、SOX2、SALL2和OLIG2。
【人Huvec細胞 來源:通派細胞庫 人臍靜脈內皮細胞】
研究顯示,在體外培養(yǎng)的細胞和動物模型中,這些轉錄因子都能將已分化的腫瘤細胞重編程為膠質母細胞瘤干細胞。
【人CNE-2細胞 來源:通派細胞庫 人鼻咽癌細胞】
研究指出,在人類膠質母細胞瘤2-7%的細胞中,上述四個轉錄因子及其相應的調控元件(與轉錄因子結合的dna片段)都處于活躍狀態(tài)。
【人Sw1990細胞 來源:通派細胞庫 人胰腺癌細胞】
這些細胞還同時表達有另一個已知的干細胞標志。此外,以四個轉錄因子之一作為靶標,可以使膠質母細胞瘤干細胞喪失干細胞特性并走向死亡。
【小鼠MEF細胞 來源:通派細胞庫小鼠胚胎成纖維細胞】
癌細胞的侵襲性有多種原因,我們知道,同樣的基因組可以塑造多種不同的細胞類型。同樣,一個腫瘤之中也含有不同的細胞亞群:腫瘤干細胞和更為分化的腫瘤細胞。鑒定那些促使腫瘤細胞亞群形成的因子,可以幫助人們更好的處理一些極其難治的腫瘤。"