細(xì)胞：KYSE-150細(xì)胞

中文名稱：人食管癌細(xì)胞

生長特性：貼壁

培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基  血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

收到細(xì)胞后請盡快更換配套培養(yǎng)基，或自己配置的新鮮培養(yǎng)基（含15%血清），如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時）。

KYSE-150細(xì)胞傳代：

1）：細(xì)胞密度約80%時，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意根據(jù)實際情況，把握消化時間）。

2）：鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時；

（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，即可肉眼可見細(xì)胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）

直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落，吹散。

3）：取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；）

實驗室發(fā)現(xiàn)細(xì)胞重編程期間端粒長度增加；這種增加是非常重要的因為它允許干細(xì)胞獲得其不死特性。

（Meth-A細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫）

一年以后，證明胚胎干細(xì)胞中SIRT1 水平增加，SIRT1屬于sirtuin蛋白家族與端粒、基因組穩(wěn)定性和DNA損傷響應(yīng)維護(hù)有關(guān)。研究人員問題是：SIRT1參與細(xì)胞重編程嗎?

（人Hek-293細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 人胚腎細(xì)胞）

使用移除SIRT1的小鼠模型和培養(yǎng)細(xì)胞作為研究工具，該小組發(fā)現(xiàn)這種蛋白是正確和安全出現(xiàn)重編程所必需的。我們觀察缺乏SIRT1的細(xì)胞重編程；

（小鼠Renca細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 小鼠腎癌細(xì)胞）

但隨著時間的推移產(chǎn)生iPS細(xì)胞延長端粒效率低，并且遭受染色體畸變和DNA損傷，SIRT1 幫助iPS細(xì)胞保持健康。

（人Hela細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 人宮頸細(xì)胞）

描述iPS細(xì)胞這一保護(hù)效應(yīng)如何作用，在某種程度上，由cMYC(原癌基因)調(diào)節(jié)劑介導(dǎo)的。SIRT1減慢cMYC的退化，導(dǎo)致細(xì)胞中端粒末端轉(zhuǎn)移酶(這種酶可增加端粒長度)增加。

（人Intestine 407細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫  人小腸細(xì)胞）

該研究揭示了細(xì)胞重編程如何保證干細(xì)胞的健康功能。這一認(rèn)識將有助于克服iPS細(xì)胞使用的障礙，也許用于再生醫(yī)學(xué)。