細(xì)胞：IAR20細(xì)胞

中文名稱：大鼠肝細(xì)胞

生長特性：貼壁

培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

收到細(xì)胞后請盡快更換配套培養(yǎng)基，或自己配置的新鮮培養(yǎng)基（含15%血清），如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長不宜超過72小時(shí)）。

IAR20細(xì)胞傳代：

1）：細(xì)胞密度約80%時(shí)，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意根據(jù)實(shí)際情況，把握消化時(shí)間）。

2）：鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)；

（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，即可肉眼可見細(xì)胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）

直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落，吹散。

3）：取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；）

體細(xì)胞可以被重新編程為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(Ips)；研究對于理解細(xì)胞重編程以及它的功能邁進(jìn)了重要的一步：發(fā)現(xiàn)了Wnt信號(hào)通路在體細(xì)胞轉(zhuǎn)化為iPS細(xì)胞的關(guān)鍵作用。（人LOVO 來源：通派細(xì)胞庫 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞）

一般情況下，轉(zhuǎn)錄因子是用來試圖增加或減少細(xì)胞重編程過程。發(fā)現(xiàn)通過抑制Wnt信號(hào)通路，可以提高細(xì)胞重編程過程的效率。

Wnt信號(hào)通路是細(xì)胞內(nèi)的一系列的生物化學(xué)反應(yīng)。例如，在青蛙和蜥蜴中，如果它們受到傷害，這些反應(yīng)在四肢再生發(fā)揮作用。雖然一般情況下，人類和哺乳動(dòng)物已經(jīng)失去了這種再生能力，但Wnt信號(hào)通路在胚胎發(fā)育和細(xì)胞融合過程中仍然發(fā)揮很多作用。（人MDA-MB-231 來源：通派細(xì)胞庫  人乳癌細(xì)胞）

為了解Wnt信號(hào)通路在重編程的作用，研究了Wnt信號(hào)途徑在體細(xì)胞轉(zhuǎn)化成iPS細(xì)胞的整個(gè)過程的行為，這個(gè)通常持續(xù)兩個(gè)星期。這是個(gè)及其動(dòng)態(tài)的過程，這條信號(hào)通路經(jīng)常搖擺不定，一直都不活躍。

（人MCF-7  來源：通派細(xì)胞庫 人乳癌細(xì)胞）

有兩個(gè)階段，以及它們相互影響，Wnt信號(hào)滿足不同的功能。通過在過程開始時(shí)抑制Wnt信號(hào)通路并且在過程結(jié)束時(shí)激活它，可以提高重編程的效率，并獲得更多的多能干細(xì)胞。（人KPL-1  來源：通派細(xì)胞庫 人乳癌細(xì)胞）

為了能夠人為的控制這個(gè)途徑，該研究團(tuán)隊(duì)構(gòu)建了一個(gè)名為Iwp2的化學(xué)分子，它是一個(gè)Wnt分泌抑制劑，不會(huì)改變細(xì)胞，一些其他重組研究使用不同的因素仍未能實(shí)現(xiàn)。（人OVCAR-3 來源：通派細(xì)胞庫 人乳癌細(xì)胞）

Wnt信號(hào)通路被激活的準(zhǔn)確時(shí)間也是至關(guān)重要的。例如如果太早，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞提前分化成神經(jīng)元或內(nèi)胚層細(xì)胞，這些細(xì)胞都不能夠進(jìn)行細(xì)胞重編程。

（ONCO-DG-1  來源：通派細(xì)胞庫 甲狀腺乳癌細(xì)胞）

這對于細(xì)胞重編程領(lǐng)域是一個(gè)非常重要且創(chuàng)新的進(jìn)步，因?yàn)榈浆F(xiàn)在為止，這個(gè)過程的效率非常低。許多研究團(tuán)隊(duì)試圖了解體細(xì)胞轉(zhuǎn)化為多能干細(xì)胞的機(jī)制，以及如何阻止這一過程和怎樣才能讓一小部分細(xì)胞最終被重新編程。我們提供了關(guān)于這些過程為什么會(huì)發(fā)生的信息；