細(xì)胞:HS683細(xì)胞
中文名稱:人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換配套培養(yǎng)基,或自己配置的新鮮培養(yǎng)基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過72小時(shí))。
HS683細(xì)胞傳代:
1):細(xì)胞密度約80%時(shí),吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意根據(jù)實(shí)際情況,把握消化時(shí)間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí);
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,即可肉眼可見細(xì)胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。
3):取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員,以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員,避免不必要的損失;)
誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)能發(fā)育成多種細(xì)胞和組織,在再生醫(yī)療領(lǐng)域有廣闊應(yīng)用前景,但卻面臨難以大量生產(chǎn)和培養(yǎng)成本高等難題。研究小組開發(fā)出一種新方法,有望實(shí)現(xiàn)批量生產(chǎn)。
(人FaDu 來源:通派細(xì)胞庫(kù) 人咽鱗癌細(xì)胞)
研究人員曾發(fā)現(xiàn),利用培養(yǎng)皿增殖ips細(xì)胞時(shí),每個(gè)培養(yǎng)皿中新生的iPS細(xì)胞數(shù)量很有限。如果在底部很深的容器中加入培養(yǎng)液,該細(xì)胞又會(huì)沉到容器底部,也很難增殖。
(人MS751 來源:通派細(xì)胞庫(kù) 人子宮頸表皮癌細(xì)胞)
假如為了不讓細(xì)胞下沉而攪拌培養(yǎng)液,又會(huì)損傷細(xì)胞。此外,這種細(xì)胞的團(tuán)塊變大后,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)還可能無法到達(dá)其內(nèi)部,也會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡。(人ME-180 來源:通派細(xì)胞庫(kù) 人子宮頸表皮癌細(xì)胞)
在著手解決上述問題時(shí)發(fā)現(xiàn),如果將食品添加劑中作為增稠劑使用的“結(jié)冷膠"加入培養(yǎng)液,iPS細(xì)胞就不會(huì)下沉。假如再同時(shí)使用另一種名為“甲基纖維素"的食品添加劑,則能使長(zhǎng)大的細(xì)胞團(tuán)塊間出現(xiàn)縫隙,不易粘在一起。
(人HCC 94 來源:通派細(xì)胞庫(kù) 人子宮鱗細(xì)胞(高分化))
這樣,iPS細(xì)胞就不會(huì)因其細(xì)胞團(tuán)塊內(nèi)部缺乏營(yíng)養(yǎng)而死亡。這兩個(gè)問題的解決不但有助提高細(xì)胞培養(yǎng)效率,還降低了培養(yǎng)成本。測(cè)試結(jié)果顯示,在裝有200毫升培養(yǎng)液的容器中,能夠獲得相當(dāng)于20個(gè)直徑10厘米的培養(yǎng)皿所獲得的iPS細(xì)胞。
(人NCI-H226 來源:通派細(xì)胞庫(kù) 人肺鱗癌細(xì)胞)
這些干細(xì)胞的質(zhì)量非常高,擁有發(fā)育為其他細(xì)胞的能力。此外,還確認(rèn)利用這種方法培育胚胎干細(xì)胞也能取得類似的積極效果。