細(xì)胞：KELLY細(xì)胞

中文名稱：人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞    

生長(zhǎng)特性：貼壁

培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

KELLY細(xì)胞傳代：

1）：細(xì)胞密度約80%時(shí)，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意根據(jù)實(shí)際情況，把握消化時(shí)間）。

2）：鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)；

（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，即可肉眼可見(jiàn)細(xì)胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）

直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落，吹散。

3）：取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。

收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換配套培養(yǎng)基，或自己配置的新鮮培養(yǎng)基（含15%血清），如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí)）。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；）

膜蛋白對(duì)于光合作用、視覺(jué)等功能至關(guān)重要。它們還是細(xì)胞的看門人，能決定什么可能會(huì)通過(guò)細(xì)胞膜，也幫助從細(xì)胞膜外部輸入養(yǎng)料和將內(nèi)部垃圾輸出。由于這些多重角色，它們構(gòu)成了很大一部分的藥物靶點(diǎn)。雖然它們的功能很明確，但是關(guān)于它們?nèi)绾握郫B的信息卻遠(yuǎn)遠(yuǎn)落后于球狀蛋白質(zhì)。

（人HO-8910細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人卵巢癌細(xì)胞）（Eahy926細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 腸系膜下腔動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞）

使用原始的基因組信息，來(lái)預(yù)測(cè)氨基酸鏈將如何通過(guò)遵循阻力最小的途徑(取決于鏈上每個(gè)殘基相關(guān)的能量)，折疊成為功能蛋白質(zhì)。一個(gè)蛋白質(zhì)越接近于其功能性“原始"狀態(tài)，它就會(huì)越穩(wěn)定。開創(chuàng)性理論生動(dòng)地將這種能量描繪成一個(gè)漏斗。

（兔VX2細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 兔肝癌細(xì)胞）（人QSG7701細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人正常肝細(xì)胞）

為了檢測(cè)他們的計(jì)算機(jī)模型，研究將它們與X射線晶體學(xué)獲得的真實(shí)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行比較。大量的結(jié)構(gòu)對(duì)球狀折疊的蛋白質(zhì)是可用的，這些蛋白漂浮在體內(nèi)，執(zhí)行生命的任務(wù)。

（人Hep2細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人喉鱗癌細(xì)胞）（人KB細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人口腔表皮樣癌細(xì)胞）

很難獲得跨膜蛋白的相似結(jié)構(gòu)，因?yàn)橐崛∷鼈冇糜诔上瘢瑫r(shí)又不會(huì)破壞它們，難度非常的大。研究利用一種去垢劑洗掉目的蛋白上的大多數(shù)膜，它在蛋白質(zhì)周圍留下一個(gè)脂肪層，但是卻給出一種涂層，可使整個(gè)分子在后來(lái)形成晶格。

（人RPMI 4788細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人大腸癌細(xì)胞）（人FL細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人羊膜細(xì)胞）

聯(lián)想記憶、水介導(dǎo)的結(jié)構(gòu)和能量模型(AWSEM)，來(lái)解釋膜蛋白所的外界影響，包括將部分折疊蛋白質(zhì)插入膜的易位子機(jī)制和膜本身。利用這種算法，成功確定熱力學(xué)漏斗在膜蛋白折疊中似乎仍然占據(jù)上風(fēng)，如同它們?yōu)榍驙畹鞍踪|(zhì)所做的。

（人WISH細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人羊膜細(xì)胞）（人L-o2細(xì)胞  來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人正常胚胎肝細(xì)胞）

了解在它們之間轉(zhuǎn)換的參數(shù)。這些參數(shù)兩個(gè)殘基(珠)應(yīng)該相互作用的多么強(qiáng)烈，并考慮周圍的環(huán)境。這可讓我們能夠從原始序列做出預(yù)測(cè)。隨著越來(lái)越多的結(jié)構(gòu)變得可用，研究希望調(diào)整AWSEM膜算法。

（人Chang Liver細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人chang式肝細(xì)胞）（人HL-7702細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù)  人肝細(xì)胞）

這表明大部分的漏斗形折疊發(fā)生在蛋白質(zhì)進(jìn)入膜之后，很少是因?yàn)槭杷?動(dòng)力學(xué))相互作用，疏水性相互作用在球狀蛋白質(zhì)折疊中發(fā)揮了更大的作用。根據(jù)原始的基因組序列，相當(dāng)好地預(yù)測(cè)膜蛋白結(jié)構(gòu)。這對(duì)于解釋新一代的實(shí)驗(yàn)結(jié)果將非常的有用。