細(xì)胞：HL細(xì)胞
中文名稱：人胚肺二倍體細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁
培養(yǎng)基：MEM+10%FBS（GIBCO胎牛血清）
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
HL細(xì)胞傳代：
1）：細(xì)胞密度約80%時(shí)，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意根據(jù)實(shí)際情況，把握消化時(shí)間）。
2）：鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)；
（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，即可肉眼可見細(xì)胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）
直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落，吹散。
3）：取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。
收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換配套培養(yǎng)基，或自己配置的新鮮培養(yǎng)基（含15%血清），如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過72小時(shí)）。
（網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；）
多數(shù)細(xì)胞不能分裂，除非有足夠的氧氣存在以支持它們的后代，但是某些癌細(xì)胞和其他細(xì)胞類型規(guī)避了這個(gè)規(guī)則。【人KHM-5M 來源：通派細(xì)胞庫(kù) 人未分化甲狀腺乳狀癌細(xì)胞】研究人員鑒定出廢除細(xì)胞警告信號(hào)的機(jī)制，使得癌細(xì)胞能夠繼續(xù)分裂即使在沒有強(qiáng)大的血液供給條件下。
在這個(gè)過程中，研究人員發(fā)現(xiàn)溶酶體——細(xì)胞的蛋白質(zhì)‘重復(fù)利用中心’——幫助控制細(xì)胞分裂的決定。【人Daoy 來源：通派細(xì)胞庫(kù) 人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞】還發(fā)現(xiàn)了新的證據(jù)表明某些藥物能夠停止腫瘤的生長(zhǎng)，具有高水平的蛋白HIF-1α。
低水平氧氣促進(jìn)HIF-1α的產(chǎn)生與活化，它以兩種方式保護(hù)細(xì)胞。它開啟一些基因產(chǎn)生蛋白幫助細(xì)胞適應(yīng)氧氣不足?！救薈AL-62 來源：通派細(xì)胞庫(kù) 人甲狀腺未分化癌細(xì)胞】它也能停止DNA復(fù)制，防止細(xì)胞分裂并增加更多需氧細(xì)胞到一個(gè)已經(jīng)很惡劣的環(huán)境中。
了解某些細(xì)胞忽略HIF-1α的警告并且繼續(xù)分裂，團(tuán)隊(duì)尋找HIF-1α與Cdk1、Cdk2之間的關(guān)系，【人BHT101 來源：通派細(xì)胞庫(kù) 人未分化甲狀腺乳狀癌細(xì)胞】這一蛋白已知調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂的決定。發(fā)現(xiàn)HIF-1α與兩者可以相互作用，但是Cdk1增加HIF-1α水平，而Cdk2減低HIF-1α水平。
懷疑Cdk1與Cdk2按照HIF-1α的指示行事通過細(xì)胞的微型“垃圾處理器”稱為蛋白酶體標(biāo)記或者不標(biāo)記毀滅?！救薆-CPAP 來源：通派細(xì)胞庫(kù) 人甲狀腺乳狀癌細(xì)胞】但研究人員限制蛋白酶體的功能后，他們發(fā)現(xiàn)并沒有改變HIF-1α的水平。相反，結(jié)果證明是Cdk1與Cdk2通過細(xì)胞的溶酶體標(biāo)記或者不標(biāo)記毀滅改變了HIF-1α水平。
值得注意的是，在某些腫瘤細(xì)胞中，【人8305C 來源：通派細(xì)胞庫(kù) 人甲狀腺未分化癌細(xì)胞】Cdk2能夠增加HIF-1α的水平同時(shí)也刺激其基因激活作用。有效效應(yīng)是細(xì)胞連續(xù)分裂同時(shí)應(yīng)付低氧水平。在培養(yǎng)的細(xì)胞中，藥物抑制Cdk1以防止HIF-1α水平的下降，并且恢復(fù)停止細(xì)胞分裂的能力，揭示它們也許能有效治療某些腫瘤。
