細胞:COS-1細胞
中文名稱:非洲綠猴SV40轉化的腎細胞
生長特性:貼壁
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
COS-1細胞傳代:
1):細胞密度約80%時,吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意根據(jù)實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時;
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處,即可肉眼可見細胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。
3):取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
收到細胞后請盡快更換配套培養(yǎng)基,或自己配置的新鮮培養(yǎng)基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時)。
(網(wǎng)絡信息主針對網(wǎng)絡推廣作用,僅供參考,細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)
確定DNA修復的關鍵步驟,這有可能有助于開發(fā)遺傳性疾病的靶向基因治療法,(人HS-746T細胞 來源:通派細胞庫 人胃癌細胞系)如“月球來的孩子"和結腸癌的常見形式。這種疾病是由錯誤的DNA修復系統(tǒng)引起的,該系統(tǒng)提高患癌癥和其它條件的風險。
當DNA被破壞時,一個特定的蛋白質首先必須被“解開扣子",(人A875細胞 來源:通派細胞庫 人黑色素瘤細胞)以方便獲取DNA的“修理隊"。如果沒有蛋白解開這一過程,進入受損位點的這一過程會被染色質的緊湊排列的基因和蛋白質阻攔。
每個人體細胞都會遭受各種各樣的攻擊,(人HDQ-P1細胞 來源:通派細胞庫 人乳癌細胞)每天最多可以創(chuàng)建100,000個DNA損傷。細胞必須不斷的修復這些損傷,以及迅速產(chǎn)生可替代的DNA和蛋白質。
RNA聚合酶就像一個小火車頭,(人H2347細胞 來源:通派細胞庫 人肺癌細胞)不斷來回地進行DNA的復制遺傳信息。當它達到蛋白質是細胞所需的一個基因時,它就會停止,并解開雙鏈DNA,然后復制一條鏈,并將這條鏈發(fā)送到機器中生產(chǎn)新的蛋白質。
當DNA遭到紫外線輻射或有害物質損壞時,(人A-204細胞 來源:通派細胞庫 人橫紋肌肉瘤細胞)它就會形成一個堅不可摧的塊狀,使得RNA聚合酶停止。就像鐵軌上的巨石,毫無生命的腫塊阻斷了該基因生產(chǎn)所有的蛋白質。除非很快就能夠進行修復,否則細胞就會死亡。
在健康的人群中,酶的維修人員與RNA聚合酶一同移動,(人H441細胞 來源:通派細胞庫 人肺腺癌細胞)并立即沖進去切除損傷和消除痕跡。這就是所謂的轉錄偶聯(lián)修復,或TCT,四個已知的DNA修復系統(tǒng)之一的一個方面。在任何修復系統(tǒng)中,甚至只有局部缺陷都有可能導致危及生命的病癥。