細(xì)胞：SNU449細(xì)胞

中文名稱(chēng)：人肝癌細(xì)胞

生長(zhǎng)特性：貼壁

培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基  血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

SNU449細(xì)胞傳代：

1）：細(xì)胞密度約80%時(shí)，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意根據(jù)實(shí)際情況，把握消化時(shí)間）。

2）：鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)；

（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，即可肉眼可見(jiàn)細(xì)胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）

直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落，吹散。

3）：取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。

收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換配套培養(yǎng)基，或自己配置的新鮮培養(yǎng)基（含15%血清），如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí)）。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢(xún)細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢(xún)細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；）

白色脂肪組織以脂肪的形式儲(chǔ)存多余的熱量，以便可以在禁食期間供其他器官利用。哺乳動(dòng)物也有少量的棕色脂肪組織，這主要是用于有效脂肪燃燒，（人JeKo-1細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞）用于產(chǎn)生熱量?，F(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)人體白色脂肪細(xì)胞被重新編程成為棕色脂肪細(xì)胞的機(jī)制。

白色脂肪組織褐變會(huì)增加身體能量的消耗，（小鼠MS1細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 小鼠胰島內(nèi)皮細(xì)胞）因此，或是肥胖癥未來(lái)治療的潛在策略。但面臨的挑戰(zhàn)是要重新編程白色脂肪組織中存儲(chǔ)能量的白色脂肪細(xì)胞轉(zhuǎn)化為所謂的“Brite"(白-棕色)脂肪細(xì)胞，從而使脂肪組織燃燒存儲(chǔ)的多余能量。

在褐變過(guò)程中，研究人員采用了先進(jìn)的基因組測(cè)序技術(shù)，已經(jīng)調(diào)查了白色脂肪細(xì)胞的基因組如何被重新編程。我們用治療II型糖尿病的藥物刺激人體白色脂肪細(xì)胞褐變，（人SUP-B15細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人Ph+急淋白血病細(xì)胞系）并與白脂肪細(xì)胞比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)“Brite"(白-棕色)脂肪細(xì)胞有不同的基因程序，當(dāng)處于激活的狀態(tài)時(shí)，這些細(xì)胞能消耗能量。

通過(guò)識(shí)別那些直接參與重編程的基因組區(qū)域，（人H460細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞）研究人員也確定了在這個(gè)過(guò)程中的一個(gè)重要因素即基因調(diào)節(jié)蛋白KLF11(Kruppel樣因子-11)，這是在所有的脂肪細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的蛋白，并且我們已經(jīng)表明它對(duì)于重新編程發(fā)生是必需；