細(xì)胞:T98G細(xì)胞
中文名稱:人膠質(zhì)瘤細(xì)胞
生長特性:貼壁
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
T98G細(xì)胞傳代:
1):細(xì)胞密度約80%時,吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細(xì)胞(注意根據(jù)實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時;
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,即可肉眼可見細(xì)胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。
3):取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存。
收到細(xì)胞后請盡快更換配套培養(yǎng)基,或自己配置的新鮮培養(yǎng)基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時)。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員,以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫管理員,避免不必要的損失;)
開發(fā)出一種小分子激活劑和抑制劑來調(diào)整熱休克反應(yīng),eEF1A1同時控制熱休克反應(yīng)的每一個步驟。eEF1A1通過招募一個關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子對熱休克基因激活轉(zhuǎn)錄。
(人hFOB 1.19細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞)
它也穩(wěn)定了HSP的mRNA,并幫助這些RNA轉(zhuǎn)出細(xì)胞核并將它們傳遞到細(xì)胞的核糖體中用于蛋白質(zhì)的合成。以這種方式,eEF1A1掌管了響應(yīng)于應(yīng)力制造HSP的整個過程。然后HSP結(jié)合到其他的蛋白質(zhì)中,阻止其毒性聚集。(人293FT細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人胚腎細(xì)胞)
該eEF1A蛋白在不同的組織中被表達(dá)為兩個類似的形式,1和2。例如,運動神經(jīng)元表達(dá)形式2(eEF1A2),其不支持熱休克反應(yīng)。(人HUH7細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 人肝癌細(xì)胞)
他們認(rèn)為,這就是為什么這些特殊細(xì)胞無法安裝熱休克反應(yīng)的原因,因此這些運動神經(jīng)元特別容易受到壓力和疾病,如ALS。在藥物開發(fā)所面臨的挑戰(zhàn)將是通過調(diào)節(jié)eEF1A的活性恢復(fù)運動神經(jīng)元的熱休克反應(yīng)。(人Hep-3B2.1-7細(xì)胞 Hep3B細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫 )
Nudler實驗室在這項研究中使用的是各種人類和小鼠細(xì)胞系。