細(xì)胞:F81細(xì)胞
中文名稱:貓腎細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換配套培養(yǎng)基,或自己配置的新鮮培養(yǎng)基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過72小時(shí))。
F81細(xì)胞傳代:
1):細(xì)胞密度約80%時(shí),吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意根據(jù)實(shí)際情況,把握消化時(shí)間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí);
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,即可肉眼可見細(xì)胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。
3):取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員,以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員,避免不必要的損失;)
研究具有Kras基因突變的胰腺細(xì)胞。Kras可產(chǎn)生一種調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂的蛋白質(zhì),這個(gè)基因往往在許多癌癥中發(fā)生突變。超過95%的胰腺癌病例都具有Kras突變。
詳細(xì)描述了引起具有Kras突變的腺泡細(xì)胞轉(zhuǎn)化為導(dǎo)管樣細(xì)胞(具有干細(xì)胞樣特性)的步驟。干細(xì)胞,當(dāng)能夠隨意分裂時(shí),也常常參與癌癥的發(fā)生。(人Caki-1細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫(kù) 人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞)
發(fā)現(xiàn)腺泡細(xì)胞中的Kras蛋白質(zhì),可誘導(dǎo)一個(gè)分子(ICAM-1)的表達(dá),這個(gè)分子可吸引巨噬細(xì)胞——一種特殊的免疫細(xì)胞。
這些炎癥性巨噬細(xì)胞會(huì)釋放多種蛋白質(zhì),包括一些解開細(xì)胞結(jié)構(gòu)的蛋白,使腺泡細(xì)胞轉(zhuǎn)變成不同類型的細(xì)胞。這些步驟產(chǎn)生了胰腺癌前期病變。(豬ST細(xì)胞 來源:通派細(xì)胞庫(kù) 豬細(xì)胞)
Kras突變和炎癥環(huán)境之間的直接關(guān)聯(lián),可驅(qū)動(dòng)胰腺癌的發(fā)生。在實(shí)驗(yàn)室小鼠中可以終止這個(gè)過程??梢酝ㄟ^兩種方式做到這一點(diǎn)——消耗巨噬細(xì)胞或用一種關(guān)閉ICAM-1的抑制性抗體處理轉(zhuǎn)化細(xì)胞。任何一種方式都能減少癌前期病變的數(shù)量。
一種阻斷ICAM-1的中和抗體已經(jīng)開發(fā)出來。目前,它正在各種各樣的疾病中進(jìn)行測(cè)試,包括中風(fēng)和風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。