細胞:PK-1細胞
中文名稱:豬腎細胞
生長特性:貼壁
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
收到細胞后請盡快更換配套培養(yǎng)基,或自己配置的新鮮培養(yǎng)基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時)。
PK-1細胞傳代:
1):細胞密度約80%時,吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意根據(jù)實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時;
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處,即可肉眼可見細胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。
3):取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
(網(wǎng)絡信息主針對網(wǎng)絡推廣作用,僅供參考,細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)
當談到老化,衰老細胞有一個壞的聲譽。而細胞衰老(一種過程,其中當細胞應激時,失去分裂能力)通過停止癌前細胞的生長來抑制癌癥。
(鼠MUTZ-1細胞 來源:通派細胞庫 骨髓增生異常綜合征細胞)(大鼠PC12細胞 來源:通派細胞庫 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞)
當談到傷口愈合,衰老細胞充當好成員。此外,確定了有促進傷口愈合作用的衰老細胞所分泌的因素之一。
使用了兩種不同的小鼠模型:第一種,衰老細胞可以可視化,能在活動物體內(nèi)被消除;第二種,小鼠體內(nèi)兩個關鍵基因的突變阻止衰老程序。
(大鼠GH3-T細胞 來源:通派細胞庫 大鼠垂體瘤細胞)(人CWR22RV1細胞 來源:通派細胞庫 人前列腺癌細胞)
小鼠皮膚出現(xiàn)傷口后,那些產(chǎn)生膠原蛋白和位于血管內(nèi)的細胞更早就發(fā)生了衰老,衰老細胞通過分泌PDGF-AA加速傷口閉合,PDGF-AA是存在于血小板內(nèi)的生長因子。能夠應用重組PDGF-AA到創(chuàng)傷小鼠,恢復小鼠的傷口愈合。
(人DU145細胞 來源:通派細胞庫 人前列腺癌細胞)(人LNCAP細胞 來源:通派細胞庫 人前列腺癌細胞)
衰老細胞在組織修復過程中僅存在一個很短的時間,而相比之下,在老化或慢性損傷組織中,衰老細胞持久存在。事實上,在體外誘導細胞衰老實驗中,PDGF-AA是非常早的活化,表明該分泌因子隨時間變化而發(fā)揮不同的調(diào)節(jié)功能的可能性,這就可以部分解釋衰老細胞的有益與有害作用。