細(xì)胞：Ishikawa細(xì)胞

中文名稱：人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞

生長(zhǎng)特性：貼壁

培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基  血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換配套培養(yǎng)基，或自己配置的新鮮培養(yǎng)基（含15%血清），如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過72小時(shí)）。

Ishikawa細(xì)胞傳代：

1）：細(xì)胞密度約80%時(shí)，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意根據(jù)實(shí)際情況，把握消化時(shí)間）。

2）：鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)；

（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，即可肉眼可見細(xì)胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）

直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落，吹散。

3）：取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；）

成功地將人類機(jī)體的疤細(xì)胞轉(zhuǎn)化成為血管細(xì)胞，研究發(fā)現(xiàn)為開發(fā)修復(fù)損傷組織的療法以及改善機(jī)體組織供血、氧氣、營(yíng)養(yǎng)的新方法提供了一定的幫助和希望。

（大鼠H9C2細(xì)胞  來源：通派細(xì)胞庫(kù) 大鼠心肌細(xì)胞）（人CCRM-CEM細(xì)胞  來源：通派細(xì)胞庫(kù) 人T淋巴白血病細(xì)胞）

利用小分子和蛋白來完成治療細(xì)胞類型的分化轉(zhuǎn)移，在特殊情況下我們就可以將成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化成為所需的細(xì)胞類型。

（大鼠CBRH7919 細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫(kù)  大鼠肝癌細(xì)胞）（大鼠HBZY-1細(xì)胞  來源：通派細(xì)胞庫(kù) 大鼠腎小球系膜細(xì)胞EC）

首先將成纖維細(xì)胞暴露于多聚胞(polyinosinic-polycytidylic acid，poly I：C)中，雙鏈RNA分子的一小部分會(huì)結(jié)合宿主細(xì)胞的TLR3(toll樣受體3)來“哄騙"細(xì)胞好像針對(duì)病毒攻擊那樣產(chǎn)生反應(yīng)；

（人293T細(xì)胞  來源：通派細(xì)胞庫(kù) 人胚腎細(xì)胞）（小鼠S-180細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫(kù)  小鼠肉瘤細(xì)胞）

揭示了成纖維細(xì)胞對(duì)病毒攻擊的反應(yīng)，在利用poly I：C處理成纖維細(xì)胞后，觀察到了細(xì)胞核染色質(zhì)的重新組裝，這種組裝可以使得之前關(guān)閉的基因重新表達(dá)，隨后利用諸如VEGF等因子對(duì)成纖維細(xì)胞進(jìn)行處理，就可以將少量分化的細(xì)胞轉(zhuǎn)化成為內(nèi)皮細(xì)胞。

（大鼠GH3細(xì)胞  來源：通派細(xì)胞庫(kù) 大鼠垂體瘤細(xì)胞）（人T-47D細(xì)胞  來源：通派細(xì)胞庫(kù) 人乳管癌細(xì)胞）

可以將2%的成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化成為內(nèi)皮細(xì)胞，這種比例可以和其它利用病毒及基因療法得到的轉(zhuǎn)化率等同，目前我們可以使得轉(zhuǎn)化率高達(dá)15%；并不想讓所有的成纖維細(xì)胞都發(fā)生轉(zhuǎn)化，因?yàn)槌衫w維細(xì)胞還發(fā)揮著非常重要的作用，只是促進(jìn)部分的疤細(xì)胞轉(zhuǎn)化成為血管細(xì)胞，從而為損傷組織提供血液供給。

（人SHG44細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫(kù)  人惡性星型膠質(zhì)瘤細(xì)胞）（Jurkat細(xì)胞  來源：通派細(xì)胞庫(kù) 急性T細(xì)胞白血病細(xì)胞）

隨著研究的深入，將已經(jīng)轉(zhuǎn)化的人類細(xì)胞(血管細(xì)胞)引入到免疫缺陷的小鼠機(jī)體中，這些小鼠下肢的血液流動(dòng)較差，發(fā)現(xiàn)人類的血管細(xì)胞可以增加小鼠下肢的血管數(shù)量，有效改善其血液循環(huán)。

（小鼠LLC細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫(kù)  小鼠肺癌細(xì)胞）（人SK-BR-3細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫(kù)  人乳癌細(xì)胞）

這些血管細(xì)胞可以自發(fā)形成血管組織；下一步想去研究是否其可以拯救受傷的動(dòng)物，如果該療法可以通過增加受損組織的血液流動(dòng)從而達(dá)到治愈的目的，那么其或許就為開發(fā)治療局部缺血等一系列疾病的新型療法提供希望。