細(xì)胞:RA細(xì)胞
中文名稱(chēng):大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁
培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換配套培養(yǎng)基,或自己配置的新鮮培養(yǎng)基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí))。
RA細(xì)胞傳代:
1):細(xì)胞密度約80%時(shí),吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意根據(jù)實(shí)際情況,把握消化時(shí)間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí);
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,即可肉眼可見(jiàn)細(xì)胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。
3):取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢(xún)細(xì)胞庫(kù)管理員,以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢(xún)細(xì)胞庫(kù)管理員,避免不必要的損失;)
CRISPR源于包含著稱(chēng)作為成簇的規(guī)律間隔的短回文重復(fù)序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)dna片段的微生物免疫系統(tǒng)。
(人KB細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人口腔表皮樣癌細(xì)胞)
這一工程編輯系統(tǒng)利用了一種DNA剪切酶和一段短RNA段,后者可將這一工具引導(dǎo)到研究人員希望在基因組中引入切口或其他改變的位置。(人RPMI 4788細(xì)胞 來(lái)源:通派細(xì)胞庫(kù) 人大腸癌細(xì)胞)
以往的研究表明,相比于其他的基因組編輯技術(shù)例如轉(zhuǎn)錄激活樣效應(yīng)因子核酸酶(transcription activator-like effector nuclease, TALEN),CRISPR能夠通過(guò)這些干預(yù)更有效地引起基因組改變或突變。(人FL細(xì)胞 人羊膜細(xì)胞)
隨后研究人員利用這種強(qiáng)大的CRISPR技術(shù)剪掉了鐮狀細(xì)胞遺傳變異,用健康的基因版本替代了它。最后一步就是誘導(dǎo)這些干細(xì)胞生成成熟的血細(xì)胞。研究發(fā)現(xiàn),這些基因編輯干細(xì)胞能夠和未接受CRISPR處理的干細(xì)胞一樣有效地生成血細(xì)胞。(人L132細(xì)胞 人胚胎肺上皮細(xì)胞)(人WISH細(xì)胞 人羊膜細(xì)胞)
為了實(shí)現(xiàn)醫(yī)學(xué)應(yīng)用必須要提高干細(xì)胞生成血細(xì)胞技術(shù)的效率,并顯著地?cái)U(kuò)大規(guī)模。并且還需要測(cè)試這些實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)干細(xì)胞的安全性。研究表明,有可能在并不遙遠(yuǎn)的將來(lái)就可以向鐮狀細(xì)胞病患者提供一種令人興奮的新的治療方案。"
(人L-o2細(xì)胞 人正常胚胎肝細(xì)胞)(人Chang Liver細(xì)胞 人chang式肝細(xì)胞)
這一生成定制血細(xì)胞的方法也適應(yīng)于其他的血液疾病,并且它的潛力還不止于此。一種可能是編輯健康人的血細(xì)胞來(lái)對(duì)抗瘧疾和其他傳染原,程臨釗的研究小組希望能夠很快開(kāi)展這方面的研究。