細(xì)胞:CTLA4 Ig-24細(xì)胞
中文名稱(chēng):中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換配套培養(yǎng)基,或自己配置的新鮮培養(yǎng)基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí))。
CTLA4 Ig-24細(xì)胞傳代:
1):細(xì)胞密度約80%時(shí),吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意根據(jù)實(shí)際情況,把握消化時(shí)間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí);
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,即可肉眼可見(jiàn)細(xì)胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。
3):取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢(xún)細(xì)胞庫(kù)管理員,以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢(xún)細(xì)胞庫(kù)管理員,避免不必要的損失;)
研究確定這些遷移的小島細(xì)胞就是胰島素表達(dá)細(xì)胞,接著這些細(xì)胞就變成了更加原始的前體細(xì)胞(這種前體細(xì)胞不能制造胰島素)。
(人BT-549細(xì)胞 BT549細(xì)胞 乳導(dǎo)管癌細(xì)胞)(人Caki-2細(xì)胞 腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞)
這些叫做人類(lèi)胰島衍生前體細(xì)胞(hIPCs)的新細(xì)胞很容易擴(kuò)增。研究人員注意到hIPCs表現(xiàn)出了充分的擴(kuò)增能力——平均每60小時(shí),其細(xì)胞數(shù)量就能翻一倍。這些前體細(xì)胞不是干細(xì)胞,而只是一種過(guò)渡性細(xì)胞。
(人CAL-27細(xì)胞 舌鱗癌細(xì)胞)(人Caov-3細(xì)胞 卵巢癌細(xì)胞)
在分離了大量的hIPCs并發(fā)現(xiàn)它們的高擴(kuò)增性后,研究人員想知道是否能夠?qū)⑦@個(gè)過(guò)程逆轉(zhuǎn)過(guò)來(lái),即誘導(dǎo)這些新細(xì)胞成為產(chǎn)胰島素細(xì)胞。在第二階段的研究中,他們將hIPCs轉(zhuǎn)入到一種無(wú)血清的介質(zhì)中。
(人COLO 201細(xì)胞 結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)(人D283細(xì)胞 腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞)
結(jié)果,他們發(fā)現(xiàn)這些新細(xì)胞能夠在數(shù)周內(nèi)高效地從前體hIPCs過(guò)渡到上皮類(lèi)胰島細(xì)胞聚集體。這種細(xì)胞聚集體能夠產(chǎn)生胰島素和其它激素,但其水平遠(yuǎn)低于人類(lèi)胰島水平。這種類(lèi)胰島細(xì)胞仍然表現(xiàn)出許多原始β細(xì)胞的特征。