細(xì)胞：HSC6細(xì)胞
培養(yǎng)基：DMEM-H培養(yǎng)基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
中文名稱(chēng)：人口腔鱗癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性：貼壁
收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換配套培養(yǎng)基，或自己配置的新鮮培養(yǎng)基（含15%血清），如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí)）。
HSC6細(xì)胞傳代：
1）：細(xì)胞密度約80%時(shí)，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意根據(jù)實(shí)際情況，把握消化時(shí)間）。
2）：鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)；
（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，即可肉眼可見(jiàn)細(xì)胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）
直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落，吹散。
3）：取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。
（網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢(xún)細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢(xún)細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；）
正常對(duì)照組心肌細(xì)胞置于95% 空氣/5% CO2環(huán)境下培養(yǎng). 結(jié)果顯示, 缺氧24 h能增加培養(yǎng)介質(zhì)中NO, 硫代ba比妥酸反應(yīng)產(chǎn)物(TBARS)和乳酸脫氫酶(LDH)水平, 再給氧降低培養(yǎng)介質(zhì)中NO和水平, 增加TBARS和LDH水平.
（人HCCC-9810細(xì)胞膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞）（人HGC-27細(xì)胞胃癌細(xì)胞）
缺氧上調(diào)bcl-2, p53和p21/waf1/cip1蛋白表達(dá)水平, 而再給氧下調(diào)bcl-2蛋白表達(dá)水平, 上調(diào)p53和p21/waf1/cip1蛋白表達(dá)水平.
（人HO-8910細(xì)胞卵巢癌細(xì)胞）（人HO-8910PM細(xì)胞卵巢癌細(xì)胞）
同時(shí), 缺氧增加心肌細(xì)胞凋亡率, 而再給氧增加心肌細(xì)胞壞死率. NO供體硝普na(SNP)增加培養(yǎng)介質(zhì)中和TBARS水平, 下調(diào)bcl-2蛋白表達(dá)而上調(diào)p53和p21/waf1/cip1蛋白表達(dá)水平, 增加DNA斷裂、凋亡及壞死細(xì)胞率. （人IMR-32細(xì)胞神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞）（人KP-N-NS細(xì)胞腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞）
L-NAME和 SOD/CAT分別降低培養(yǎng)介質(zhì)中和TBARS水平, 它們均能上調(diào)bcl-2蛋白表達(dá)而下調(diào)p53和p21/waf1/cip1蛋白表達(dá)水平, 抑制DNA斷裂、凋亡及壞死細(xì)胞率, 而D-NAME則無(wú)此作用.
（人LS 180細(xì)胞結(jié)腸腺癌細(xì)胞）（人LTEP-s細(xì)胞肺鱗癌細(xì)胞）
以上結(jié)果表明, 在缺氧再給氧所致心肌細(xì)胞死亡過(guò)程中, NO和氧自由基參與下調(diào)bcl-2蛋白表達(dá)水平和上調(diào)p53和p21/waf1/cip1蛋白表達(dá)水平, 相應(yīng)地激發(fā)細(xì)胞凋亡程序, 并提示一氧化氮及氧自由基誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡的機(jī)制與調(diào)節(jié) bcl-2, p53和p21/waf1/cip1信號(hào)通路有關(guān).
