細(xì)胞:GT1-1細(xì)胞
中文名稱:小鼠垂體瘤細(xì)胞
生長特性:貼壁
培養(yǎng)基:DMEM-H培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
GT1-1細(xì)胞傳代:
1):細(xì)胞密度約80%時,吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意根據(jù)實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時;
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,即可肉眼可見細(xì)胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。
3):取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存。
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原始人類胚胎干細(xì)胞(ES)能夠在來自骨髓的特殊細(xì)胞的幫助下生長。這為人類胚胎干細(xì)胞分裂時的營養(yǎng)提供了一個容易獲得、成分清楚的營養(yǎng)來源。
(小鼠M-1細(xì)胞 腎集合管細(xì)胞)(人M619細(xì)胞 黑色素瘤細(xì)胞)
人類胚胎干細(xì)胞通常被培養(yǎng)在實驗室的小鼠細(xì)胞“飼養(yǎng)層”上。飼養(yǎng)層細(xì)胞向原始人類胚胎干細(xì)胞發(fā)出一種未知的信號,阻止其變成“成熟的”細(xì)胞類型,比如骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞或者腦細(xì)胞。
(狗MDCK superdome細(xì)胞 腎細(xì)胞)(小鼠MFC-GFP細(xì)胞 胃癌細(xì)胞)
研究小組發(fā)現(xiàn)人類骨髓基質(zhì)細(xì)胞也能作為人類胚胎干細(xì)胞的飼養(yǎng)層細(xì)胞,且可以引導(dǎo)后者無區(qū)別地分化。
(人MGC-803細(xì)胞 MGC803細(xì)胞 胃癌細(xì)胞)(人HeLa-GFP細(xì)胞 宮頸細(xì)胞)
在這樣的條件下進(jìn)行8個月的分化后,人類胚胎干細(xì)胞依然保持了原始的外形和功能。
骨髓基質(zhì)細(xì)胞與形成血液的干細(xì)胞共存在骨髓中,而且前者可以在實驗室中維持后者的生長。骨髓基質(zhì)細(xì)胞可以代替小鼠細(xì)胞來維持更原始的胚胎干細(xì)胞的生長。