細(xì)胞:DMS114細(xì)胞
中文名稱:人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁
培養(yǎng)基:DMEM-H培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
DMS114細(xì)胞傳代:
1):細(xì)胞密度約80%時(shí),吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意根據(jù)實(shí)際情況,把握消化時(shí)間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí);
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,即可肉眼可見細(xì)胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。
3):取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。
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蛋白Mbd3對(duì)胚胎干細(xì)胞分化成為特定細(xì)胞,如:腦細(xì)胞或者皮膚細(xì)胞具有重要作用。這一成果使人們進(jìn)一步認(rèn)識(shí)干細(xì)胞如何分化成為特定細(xì)胞,從而對(duì)干細(xì)胞治療有推進(jìn)作用。
(小鼠3T3細(xì)胞 胚胎成纖維細(xì)胞)(兔CCC-SMC-2細(xì)胞 平滑肌細(xì)胞)
制作缺失Mbd3蛋白的小鼠胚胎干細(xì)胞,這種干細(xì)胞會(huì)喪失分化成為特定細(xì)胞的能力。將這種細(xì)胞注射進(jìn)入小鼠的早期胚胎種,這類缺陷的細(xì)胞還是存在功能缺陷,并且破壞了胚胎的正常發(fā)育。
(人Hela S3細(xì)胞 癌細(xì)胞)(人HPAC細(xì)胞 上皮癌細(xì)胞)
已知胚胎干細(xì)胞需要特定的因子以不斷復(fù)制生成干細(xì)胞,也就是自我更新。證明當(dāng)干細(xì)胞從自我更新狀態(tài)變?yōu)榉只癄顟B(tài)需要Mbd3蛋白的表達(dá)。
(人HuT 78細(xì)胞 淋巴細(xì)胞)(人L1210細(xì)胞 淋巴細(xì)胞)