細(xì)胞:CMT93細(xì)胞
中文名稱:小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞
生長特性:貼壁
培養(yǎng)基:DMEM-H培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
CMT93細(xì)胞傳代:
1):細(xì)胞密度約80%時,吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細(xì)胞(注意根據(jù)實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時;
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,即可肉眼可見細(xì)胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。
3):取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用,僅供參考,細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員,以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn),操作前,如果有不明白之處,先咨詢細(xì)胞庫管理員,避免不必要的損失;)
“基因敲除"小鼠:
為了能夠研究PARL蛋白的功能,研究者們利用“PARL基因敲除"小鼠進行實驗,這些小鼠不能產(chǎn)生PARL蛋白。這些小鼠衰老退化很迅速——4周后喪失了肌肉力量,大大地降低了呼吸能力,并且8-12周后,它們死亡了。(小鼠B16細(xì)胞黑色素瘤細(xì)胞)(人C918細(xì)胞黑色素瘤細(xì)胞)
PARL基因的缺失導(dǎo)致了肌肉細(xì)胞的退化,這在正常衰老的過程中也會出現(xiàn)。這一結(jié)果驅(qū)使研究者繼續(xù)研究來找出PARL蛋白的功能。
(小鼠Cl.Ly1+2-/9細(xì)胞淋巴細(xì)胞)(人Daoy細(xì)胞髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞)
控制細(xì)胞死亡:
細(xì)胞的生命周期是受某種方式所控制的——一種叫做細(xì)胞程序性死亡的機制。除了供應(yīng)能量外,線粒體也擔(dān)負(fù)著確保細(xì)胞程序性死亡信號的整合和擴大的功能。
(大鼠H9c2細(xì)胞胚胎心肌細(xì)胞)(人HCC38細(xì)胞導(dǎo)管癌細(xì)胞)
PARL蛋白在線粒體中啟動了細(xì)胞程序性死亡。盡管PARL敲除小鼠的線粒體能正常發(fā)育并且能將氧轉(zhuǎn)換成能量,但是它們已經(jīng)喪失了抵抗程序性死亡的能力,并且細(xì)胞死亡得更快。
(大鼠IR983F細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞)(小鼠J774A.1細(xì)胞單核巨噬細(xì)胞)
PARL蛋白在細(xì)胞死亡的過程中起著至關(guān)重要的作用,并且很可能在像帕金森等衰老疾病的起源具有重要作用。