細(xì)胞:Capan2細(xì)胞
中文名稱:人胰腺癌細(xì)胞
生長特性:貼壁
培養(yǎng)基:MCCOY'S 5A培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
Capan2細(xì)胞傳代:
1):細(xì)胞密度約80%時,吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意根據(jù)實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時;
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,即可肉眼可見細(xì)胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。
3):取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存。
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研究PARL——一種被認(rèn)為與早老蛋白(Presenilin)相互作用的蛋白,導(dǎo)致老年癡呆疾病的主要因素之一。
之前的研究已經(jīng)表明PARL蛋白和Presenilin蛋白之間的聯(lián)系是可以忽略的。了解了PARL蛋白對細(xì)胞的線粒體來說是十分重要的,但該蛋白的功能在很長的一段時間內(nèi)未被闡明。
(大鼠 RTE細(xì)胞 大鼠氣管上皮細(xì)胞)(兔RYTF細(xì)胞 兔成纖維細(xì)胞)
為了能夠研究PARL蛋白的功能,利用“PARL基因敲除"小鼠進(jìn)行實驗,這些小鼠不能產(chǎn)生PARL蛋白。這些小鼠衰老退化很迅速——4周后喪失了肌肉力量,大大地降低了呼吸能力,并且8-12周后,它們死亡了。(人CNE-2Z細(xì)胞 人鼻咽癌細(xì)胞)(人293E細(xì)胞 人胚腎細(xì)胞)
因此,PARL基因的缺失導(dǎo)致了肌肉細(xì)胞的退化,這在正常衰老的過程中也會出現(xiàn)。這一結(jié)果驅(qū)使研究者繼續(xù)研究來找出PARL蛋白的功能。(人293ET細(xì)胞 人胚腎細(xì)胞)(人293KB細(xì)胞 人胚腎細(xì)胞)