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SK-N-BE(2)細胞傳代培養(yǎng)（人神經(jīng)母細胞瘤細胞）

時間：2024/2/23閱讀：353
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細胞：SK-N-BE(2)細胞

中文名稱：人神經(jīng)母細胞瘤細胞

生長特性：貼壁

培養(yǎng)基：DMEM-H培養(yǎng)基  血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

SK-N-BE(2)細胞傳代：

1）：細胞密度約80%時，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞（注意根據(jù)實際情況，把握消化時間）。

2）：鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處，即可肉眼可見細胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。

3）：取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存。

 

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員，以細胞庫管理員提供給您的信息為準，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細胞庫管理員，避免不必要的損失；）

干細胞是一群有潛力分化成人類身體中所有類型細胞的超級細胞。而且，人類胚胎干細胞(hES) 對于某些危及生命的疾病來說，也同樣帶來了治療希望。

但是如何保存培養(yǎng)足夠量并且健康的細胞供患者移植使用則是目前面臨的一個大問題。 

發(fā)現(xiàn)了一種可以維持大量的人類胚胎干細胞存活的方法，這一發(fā)現(xiàn)將可能降低干細胞移植治療的成本。研究人員發(fā)現(xiàn)分子神經(jīng)營養(yǎng)素(neurotrophins,NTs)對于人類胚胎干細胞能否在實驗室存活是很重要的。

雖然干細胞有潛力自我更新或分化成體內(nèi)任何一種細胞，但是如何以未分化的狀態(tài)保存活的人類胚胎干細胞仍是一大挑戰(zhàn)。 

在這項新研究中，當(dāng)研究人員將神經(jīng)營養(yǎng)素生長因子家族的三名成員（腦衍生神經(jīng)滋養(yǎng)因子BDNF、神經(jīng)營養(yǎng)素 3 (NT-3)和神經(jīng)營養(yǎng)素 4 (NT-4)）加入到培養(yǎng)的人類胚胎干細胞中，這些細胞的數(shù)量增加了36倍。

該研究結(jié)果表明用神經(jīng)營養(yǎng)素處理人類胚胎干細胞能迅速地生產(chǎn)更多人類胚胎干細胞。


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