細(xì)胞:HBVAF細(xì)胞
中文名稱:人腦血管外膜成纖維細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁
培養(yǎng)基:DMEM-H培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
HBVAF細(xì)胞傳代:
1):細(xì)胞密度約80%時(shí),吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意根據(jù)實(shí)際情況,把握消化時(shí)間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,即可肉眼可見細(xì)胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。
3):取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存。
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研究發(fā)現(xiàn)了能夠阻止抗生素成功摧毀生物膜感染的基因。發(fā)現(xiàn)了一種促使細(xì)菌生物膜對(duì)抗生素產(chǎn)生抗性的基因。
數(shù)年來,研究人員一直試圖了解一種類型的感染(生物膜)常常會(huì)對(duì)抗生素產(chǎn)生抗性的原因。生物膜含有感染所需的細(xì)胞,但是這些細(xì)胞卻不能被抗生素破壞。
(小鼠 MFC細(xì)胞 前胃癌細(xì)胞)(小鼠 RAW264.7細(xì)胞 白血病細(xì)胞)
發(fā)現(xiàn)這些頑固細(xì)胞含有一種基因——HipA,這種基因編碼一種毒素(RelE毒素),而這種毒素能使這些細(xì)胞進(jìn)入“冬眠"狀態(tài)。因?yàn)榭股刂荒茉谶@些細(xì)胞處于生活狀態(tài)下才能摧毀它們,因此這些冬眠的細(xì)胞能夠耐受抗生素并且在冬眠后重新進(jìn)行感染。(兔 RCBBF細(xì)胞 成纖維細(xì)胞)(兔 RCFBF細(xì)胞 成纖維細(xì)胞)
由于醫(yī)學(xué)研究人員正忙于找到攻克日益嚴(yán)重的藥物耐受性感染的辦法,因此這一發(fā)現(xiàn)對(duì)這些研究意義重大。生物膜感染很難治愈,有了對(duì)HipA基因的了解,生物學(xué)家有可能找到失活這個(gè)基因并消滅感染的方法。
(大鼠RTE細(xì)胞氣管上皮細(xì)胞)(兔 RYTF細(xì)胞 成纖維細(xì)胞)